Gamma GT 20×2 ml

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Determinación cuantitativa de gamma-glutamil transferasa (γ-GT). IVD.
Conservar a 2-8ºC.

PRINCIPIO DEL MÉTODO

La gamma-glutamil transferasa (γ-GT) cataliza la transferencia de un grupo γ-glutamilo de la γ-glutamil-p-nitroanillida al dipéptido aceptor glicilglicina, según la siguiente reacción:

L-γ-Glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + Glicilglicina __γ-GT__→ L-γ-Glutamil-glicilglicina + Ácido 5-amino-2-nitrobenzoico

La velocidad de formación del ácido 5-amino-2-nitrobenzoico, determinado fotometricamente, es proporcional a la concentración catalítica de γ-GT en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La gamma-glutamil transferasa (γ-GT) es una enzima que se encuentra presente en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente alta en hígado, páncreas, riñón y próstata.

La determinación de los niveles de gamma-glutamil transferasa (γ-GT) es el método mas útil para el diagnóstico y tratamiento de las enfermedades hepatobiliares como obstrucción hepática, cirrosis o tumores hepáticos.

El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

R1
Tampón
TRIS pH 8,25 100 mmol/L
R2
Substrato
Glicilglicina 100 mmol/L
L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida 3 mmol/L

PREPARACIÓN

Reactivo de trabajo (RT):
Disolver (→) un comprimido de R2 Substrato en un vial de R1 Tampón.

Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.

Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 5 días a temperatura ambiente (15-25ºC).

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.

No usar las tabletas si aparecen fragmentadas.

No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

Indicadores de deterioro de los reactivos:

  • Presencia de partículas y turbidez.
  • Absorbancias del Blanco a 405 nm ≥ 1,80.

MATERIAL ADICIONAL NO SUMINISTRADO

  • Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405 nm.
  • Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC).
  • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

Suero.

La γ-GT es estable hasta 3 días a 2-8ºC, 8 horas a 15-25ºC y 1 mes a -20ºC.

PROCEDIMIENTO

Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: 405 nm.
Cubeta: 1 cm paso de luz.
Temperatura constante: 25ºC / 30ºC / 37ºC.

 Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.

Pipetear en una cubeta:

RT (mL)
1,0
Muestra (µL)
100

Mezclar, esperar 1 minuto.

Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.

Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto (ΔA/min).

CÁLCULOS

ΔA/min x 1190= U/L de γ-GT

Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 µmol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).

Factores de conversión de temperaturas
Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:

Temperatura de medición
Factor para convertir a
25ºC
30ºC
37ºC
25ºC
1,00
1,37
1,79
30ºC
0,73
1,00
1,30
37ºC
0,56
0,77
1,00

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).

Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.

Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

 
25ºC
30ºC
37ºC
Mujeres
4-18 U/L
5-25 U/L
7-32 U/L
Hombres
6-28 U/L
8-38 U/L
11-50 U/L