Descripción

USO PREVISTO

Los sistemas de bolsas de generación de gas GasPak son sistemas de un solo uso que producen atmósferas adecuadas para favorecer el aislamiento y cultivo primarios de bacterias anaerobias, microaerófilas o capnófilas mediante el uso de sobres generadores de gas en el interior de bolsas de incubación resellables de un solo uso.

RESUMEN Y EXPLICACIÓN

En 1965, Brewer y Allgeier desarrollaron una envoltura de generación de hidrógeno desechable, que posteriormente se modificó para incluir la generación de dióxido de carbono y un catalizador interno. Los sistemas de bolsas de generación de gas GasPak EZ ofrecen rendimiento biológico y fiabilidad sin necesidad de un catalizador ni de un procedimiento de activación. Los sobres generadores de gas GasPak EZ contienen todos los componentes necesarios para crear una atmósfera específica para la incubación de muestras. El sobre y las muestras se colocan en la bolsa de incubación resellable GasPak EZ. La bolsa se sella e incuba.

PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO

El sobre de generación de gas GasPak EZ consta de un sobre de reactivo que contiene carbonato inorgánico, carbón activado, ácido ascórbico y agua. Cuando se extrae el sobre de su envoltorio externo, la exposición al aire provoca la activación del sobre. El sobre con el reactivo activado y las muestras se colocan en la bolsa resellable y ésta se sella. El sobre reduce rápidamente la concentración de oxígeno en el interior de la bolsa. Al mismo tiempo, el carbonato inorgánico produce dióxido de carbono.

Para el cultivo de bacterias anaerobias, el sistema de bolsas GasPak EZ Anaerobe con sobres indicadores producen una atmósfera anaerobia en 2,5 h con el 10 % o más de dióxido de carbono en 24 h.

Para el cultivo de bacterias microaerófilas, los sobres del sistema de bolsas GasPak EZ Campy producen una atmósfera con aproximadamente el 5-15 % de oxígeno y más del 6 % de dióxido de carbono.

Para el cultivo de microorganismos que requieren dióxido de carbono, los sobres del sistema de bolsas GasPak EZ CO₂ producen una atmósfera con más del 3 % de dióxido de carbono.

ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES

Para uso diagnóstico in vitro.

Observar las precauciones establecidas contra los peligros microbiológicos durante todos los procedimientos.

Antes de desecharlos, esterilizar en autoclave los recipientes para muestras y cualquier otro material contaminado.

Después de su uso, el sobre puede permanecer tibio. Desechar el sobre una vez finalizada la reacción (cuando se enfríe).

Desechar la bolsa en un recipiente de desechos adecuado, tras su uso. No reutilizar.

NO utilizar el sobre si la cubierta externa está abierta o dañada de alguna forma.

Evitar la luz del sol directa y las temperaturas excesivas.

NO abrir la bolsa resellable hasta que haya finalizado la incubación.

Los sobres del sistema de bolsas GasPak EZ están diseñados para ser utilizados en las bolsas resellables GasPak EZ. Su uso en otros sistemas puede originar resultados erróneos.

Las bolsas resellables GasPak EZ han sido diseñadas para los sobres del sistema de bolsas GasPak EZ. No utilizar con otras envolturas de generación de gas (p. ej., envolturas BBL GasPak/GasPak Plus).

INSTRUCCIONES DE CONSERVACIÓN

Al recibirlos, almacenar los sobres a una temperatura de 2-25 ºC en un ambiente seco.

Los sobres del sistema de bolsas GasPak EZ están listos para su uso.

La fecha de caducidad es aplicable a los sobres que estén sin abrir, intactos y correctamente almacenados.

No abrir hasta que vayan a utilizarse.

El indicador GasPak EZ anaerobio seco debe estar blanco antes de su uso. No utilizar el indicador si su color es azul antes de su uso. No tocar el comprimido indicador ni abrir el paquete indicador para sacar el comprimido.

Deterioro del producto: No utilizar los sobres de reactivos si el envase externo está abierto o dañado. No utilizar bolsas resellables que tengan desgarros o roturas u otras irregularidades.

PRINCIPIOS ACTIVOS

Ácido ascórbico, carbón activado y agua.

Advertencia: El carbón activado irrita los ojos, la piel y las vías respiratorias.

MATERIAL SUMINISTRADO

Sistema de bolsas de generación de gas GasPak EZ. Cada sistema requiere el uso de una bolsa resellable y de un sobre.

MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS

Medios de cultivo auxiliares, reactivos, microorganismos para control de calidad, equipo de laboratorio según requiera el procedimiento.

PROCEDIMIENTO DEL ANÁLISIS

Colocar las placas inoculadas dentro de la bolsa resellable. El sistema de bolsas GasPak EZ CO₂ puede utilizarse para 1-4 placas de Petri.
En cada bolsa resellable se utiliza un sobre del sistema de bolsas GasPak EZ. Extraer del envase el sobre del sistema de bolsas GasPak EZ. Retirar la cubierta externa.
Colocar el sobre activado en la bolsa resellable GasPak EZ con las placas. El sobre debe colocarse entre las placas y la bolsa. No hay necesidad de añadir un indicador anaerobio independiente.
Cerrar la bolsa presionando hasta unir la sección de cierre de la bolsa.
Incubar el sistema de bolsas GasPak EZ a una temperatura adecuada para el microorganismo que se está cultivando, pero sin superar los 45 ºC.
Tras la incubación, abrir la bolsa, retirar las placas y desechar el sobre del sistema de bolsas GasPak EZ, el indicador y la bolsa de la forma adecuada.

CONTROL DE CALIDAD DEL USUARIO

Cada sistema de bolsas de generación de gas GasPak EZ debe probarse periódicamente para determinar su capacidad de proporcionar condiciones apropiadas para el crecimiento de las bacterias adecuadas.

Sistema	Microorganismo de control de calidad
Sistema de bolsas GasPak EZ CO₂	Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424

El control de calidad debe llevarse a cabo conforme a la normativa local y/o nacional, a los requisitos de los organismos de acreditación y a los procedimientos estándar de control de calidad del laboratorio. Se recomienda consultar las instrucciones de CLSI (antes NCCLS) y normativas de CLIA correspondientes para obtener información acerca de las prácticas adecuadas de control de calidad.

Las condiciones anaeróbicas se alcanzan rápidamente en 2,5 h, con 10% o más de dióxido de carbono en 24 h a 35 ºC. A los 30 min de la activación debe producirse una condensación visible. Las placas de agar que contienen sangre muestran reducción en 2 a 4 h a 35 ºC. El indicador anaeróbico debe mostrar reducción (blanco) en 2 a 4 h a 35 ºC. Las condiciones microaerófilas se alcanzan rápidamente con una concentración de oxígeno del 5-15 % a 35 ºC. Las condiciones de enriquecimiento de dióxido de carbono se alcanzan rápidamente, con una concentración de dióxido de carbono superior al 3 % a 35 ºC.

Antes de su lanzamiento al mercado, se analizan muestras representativas de cada lote del sistema de bolsas GasPak EZ CO₂ para determinar sus características de rendimiento.

Cada sobre de muestra del sistema de bolsas GasPak EZ CO₂ se coloca en una bolsa de incubación resellable junto con 2 placas de Petri llenas de medio de cultivo. Se activa el sobre y se cierra herméticamente la bolsa según las instrucciones de su etiqueta y se incuba a 35 ± 2 °C.

Al cabo de unas 24 h se inserta una aguja de calibre 22 x 3,81 cm en la bolsa de incubación y se extrae una muestra del gas, se coloca en un cromatógrafo de gases y se analiza para determinar la cantidad de dióxido de carbono presente en la bolsa de incubación.