Descripción
DESCRIPCIÓN
Oxidase Test Stick es una prueba diagnóstica utilizada para la diferenciación e identificación microbiana, especialmente las bacterias Gram-negativas, de acuerdo a la presencia de la enzima citocromo oxidasa.
Este producto sigue las recomendaciones de EN ISO 16266 e ISO 9308-1 para la detección de Pseudomonas aeruginosa y para la confirmación de Escherichia coli y otras bacterias coliformes, respectivamente.
CONTENIDO DEL KIT
Cada paquete contiene 50 Oxidase Test Stick.
PRINCIPIO DEL MÉTODO
Las bacterias Oxidasa-positivas producen la enzima citocromo oxidasa (indofenol oxidasa) que cataliza el transporte de electrones desde el donante (NADH) al receptor (normalmente oxígeno).
En presencia de oxígeno molecular la citocromo oxidasa puede reducir a algunas sustancias orgánicas como el reactivo NaDi (1- naftol dimetilparafenileno diamina) formando el indofenol, compuesto coloreado de azul.
COMPOSICIÓN
Oxidase Test Stick está fabricado con un papel especial, conteniendo en la zona de reacción:
N,N-dimetil-1,4-fenileno diamonio cloruro 0.1 µmol; 1-naftol 1.0 µmol.
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
- Atemperar el kit antes de utilizarlo para minimizar los efectos de condesación.
- Retirar una o varias colonias bien aisladas y restregar en la zona del stick señalada con flechas. También se puede transferir una gota de la suspensión del organismo a analizar a la zona de reacción del stick o sumergir directamente la punta del stick en la suspensión microbiana.
- Examinar el posible viraje de color inmediatamente (antes de 60 segundos) en la zona donde se ha inoculado la colonia.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
El desarrollo de una coloración azul-púrpura intensa indica una reacción positiva. La invariación del color significa una reacción negativa, es decir, que el organismo a analizar no produce la enzima citocromo oxidasa.
LÍMITES
Los medios de cultivo más aconsejables para esta prueba, son aquellos que no contienen colorantes, indicadores o inhibidores. Las colonias bacterianas retiradas del medio con valores de pH inferiores a 5.5 (debido al metabolismo de los hidratos de carbono y la posterior acidificación del medio) pueden dar falsos negativos. Las colonias extraídas de medios que contengan nitratos pueden dar resultados no fiables. No utilizar hisopos o asas de acero, níquel cromo o hierro para retirar las colonias. Se recomienda que sean de plástico o utilizar aplicadores de madera.
ALMACENAMIENTO
Almacenar a 2-8°C fuera del alcance de la luz. No utilizar el producto pasada la fecha de caducidad o si muestra alguna señal de contaminación o deterioro.
CONTROL DE CALIDAD
Las cepas de control se indican en la siguiente tabla.
Microorganismo | Reacción de la oxidasa | |
---|---|---|
Escherichia coli |
WDCM 00013
|
Negativa, sin cambio de color
|
Pseudomonas aeruginosa
|
WDCM 00025
|
Positiva, coloración azul-púrpura intensa
|
Valoraciones
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