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Determinación cualitativa de anticuerpos febriles. IVD.Conservar a 2 – 8ºC.
Disponible para reserva
PRINCIPIO DEL MÉTODO
Los Antígenos Bacterianos son una técnica de aglutinación en porta y tubo para la detección y semicuantificación de anticuerpos anti-Salmonella, Brucella y Proteus en suero humano. Los reactivos, suspensiones bacterianas, coloreadas y estandarizadas, aglutinan en presencia del anticuerpo homologo correspondiente en las muestras ensayadas.
SIGNIFICADO CLÍNICO
El diagnostico de enfermedades febriles puede establecerse bien sea por el aislamiento del microorganismo en sangre, orina o heces o por la demostración del título de anticuerpos específicos, somáticos (O) y flagelares (H) en el suero del paciente. La determinación de estos anticuerpos forma las bases para el ensayo de Widal que establece que altos niveles de anticuerpos O y H superiores a 1/100 en suero, es indicativo de infección por estos microorganismos.
REACTIVOS
REACTIVO | Antígeno |
---|---|
Proteus OX2 |
somático
|
COMPOSICIÓN DE LOS REACTIVOS
CALIBRACIÓN
No existe referencia internacional para la estandarización de la sensibilidad de estos reactivos, por lo que se utiliza un control interno constituido por suero animal que contiene anticuerpos frente a cada uno de los antígenos citados anteriormente y que ha sido titulado con reactivos comerciales de calidad reconocida.
PREPARACIÓN Y ESTABILIDAD
Antígenos Bacterianos: Listos para el uso.
Controles: Listos para el uso. Mezclar los reactivos suavemente antes de usar.
Indicadores de deterioro de los reactivos: Presencia de partículas y agregados.Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad indicada en el envase cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita la contaminación durante su uso. No congelar.
MATERIAL ADICIONAL NO SUMINISTRADO
MUESTRAS
Suero fresco. Estable 8 días a 2-8ºC o 3 meses a -20ºC.
Las muestras con restos de fibrina deben ser centrifugadas antes de la prueba. No utilizar muestras altamente hemolizadas o lipémicas.
PROCEDIMIENTO
Método de aglutinación en porta (cualitativo)
Método de aglutinación en porta (titulación)
Método de aglutinación en tubo (semicuantificación)
Diluciones | 1/20 | 1/40 | 1/80 | 1/160 | 1/320 | 1/640 | … |
---|---|---|---|---|---|---|---|
Muestra (μL) |
100 |
—
|
—
|
—
|
—
|
—
|
…
|
NaCI 9 g/L (mL) |
1,9
|
1
|
1
|
1
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1
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1
|
…
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1 ml ↪️
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1 ml ↪️
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1 ml ↪️
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1 ml ↪️
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1 ml ↪️
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1 ml ➡️
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LECTURA E INTERPRETACIÓN
Método de aglutinación en porta
Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación inmediatamente después de retirar el porta del agitador y comparar los resultados con los sueros control. Los resultados obtenidos en el método de titulación en porta,son aproximadamente equivalentes a los que se obtendrían en el método de aglutinación en tubo con diluciones del suero de 1/20, 1/40, 1/80, 1/160 y 1/320 respectivamente. Cualquier resultado positivo, es aconsejable confirmar el título mediante el método de aglutinación en tubo.
Método de aglutinación en tubo
Examinar macroscópicamente el modelo de aglutinación (Nota 5) y comparar los resultados con los obtenidos en los tubos control. El control positivo debe mostrar aglutinación parcial o completa. El Control negativo no debe mostrar ningún tipo de aglutinación. Se considera como resultado positivo cualquier grado de aglutinación parcial o completa, con diversos grados de clarificación del sobrenadante. El título de la muestra se define como la dilución mayor que muestra resultado positivo.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la funcionalidad de los reactivos, así como modelo de comparación para la interpretación de resultados.Todo resultado distinto al resultado que da el control negativo, se considerará positivo.
VALORES DE REFERENCIA
Son generalmente indicativos de infección reciente: Salmonellas: Títulos ≥ 1/80 (anticuerpos somáticos) y ≥ 1/160 (anticuerpos flagelares). Brucellas: Títulos ≥ 1/80. Proteus: Una elevada proporción de individuos normales da resultados positivos con los antígenos de Proteus, especialmente en el ensayo de aglutinación en porta. Un título inferior a 1/160 en tubo, no debe considerarse significativo. El nivel normal de anticuerpos febriles varia ampliamente según los diferentes países y comunidades. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Todas las características diagnosticas de los distintos reactivos de Antígenos Bacterianos pueden encontrarse en los correspondientes Informes Técnicos que se encuentran a disposición del usuario que lo solicite.
INTERFERENCIAS
Bilirrubina (20 mg/dL), hemoglobina (10 g/L), lípidos (10 g/L) y factores reumatoides (300 UI/mL), no interfieren.
LIMITACIONES DEL MÉTODO
Las infecciones recientes, la inmunodepresión, el efecto prozona (Brucelosis) y la terapia con antibióticos (somáticos), pueden ocasionar falsas negatividades.
Se han descrito reacciones cruzadas con Brucelaen casos de infección o vacunación con algunas cepas de Vibrio cholerae, Pasteurella, Proteus OX19 y Y. enterocolitica (serotipo 9).
NOTAS
CONTIENE
1×5 ml
SGIS06 I-E 25/01/21
Marca | Spinreact |
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