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Bilirrubina total y directa Jendrassik-Gröf 1x150

Bilirrubina total y directa Jendrassik-Gröf 1×150 ml

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25,38 €

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Referencia: 1001041

Descripción

Determinación cuantitativa de bilirrubina. IVD.
Conservar a 2-8ºC 

PRINCIPIO DEL MÉTODO

La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado midiéndose fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suero, bilirrubin-glucurónido y bilirrubina libre ligada a la albúmina, sólo la primera reacciona en medio acuoso (bilirrubina directa) precisando la segunda la solubilización con cafeína para que reaccione (bilirrubina indirecta). En la determinación de la bilirrubina indirecta se determina también la directa, correspondiendo el resultado a la bilirrubina total. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de bilirrubina presente en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La bilirrubina se origina por la degradación de la hemoglobina.
Es transportada del bazo al hígado y se excreta en la bilis.
La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubina en plasma. Causas más probables de la hiperbilirrubinemia:
Bilirrubina Total: Aumento de la hemólisis, alteraciones genéticas, anemia neonatal, alteraciones eritropoyéticas, presencia de drogas.
Bilirrubina Directa: Colestasis hepática, alteraciones genéticas y alteraciones hepáticas.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

R 1
Ácido sulfanílico 30mmol/L
Ácido clorhídrico 400mmol/L
R 2
Sodio nitrito 50 mmol/L
R 3
Cafeína 100 mmol/L
Opcional
BILIRUBIN CAL Ref: 1002250

PRECAUCIONES

R1: H314-Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. EUH208-Contiene ácido sulfanílico. Puede provocar una reacción alérgica.
R3: H302.Nocivo en caso de ingestión. H371.Puede provocar daños en los órganos.
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto.

PREPARACIÓN

Todos los reactivos están listos para su uso.

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita la contaminación durante su uso.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
– Presencia de partículas y turbidez.
– Desarrollo de color en el R 2.

MATERIAL ADICIONAL

  • Espectrofotómetro o analizador con cubeta para lecturas a 540 nm.
  • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

  1. Condiciones del ensayo:
    1. Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .540 nm
    2. Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz
    3. Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15-25ºC
  2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
  3. Pipetear en una cubeta:
     
    B. Total
    B. Directa
    Blanco
    R 1 (µL) 
    200
    200
    200
    R 2 (gotas)
    1
    1
    —
    ClNa 9 g/L (mL)
    —
    2,0
    2,0
    R 3 (mL)
    2,0
    —
    —
    Muestra / Calibrador (µL)
    200
    200
    200

4. Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 15-25ºC.
5. Medir la absorbancia (A) del calibrador y la muestra

CÁLCULOS

  • Con Calibrador:

((A)Muestra – (A)BlancoMuestra / (A)Calibrador (A)BlancoCalibrador) x Conc. Calibrador = mg/dL de bilirrubina

  • Cálculo teórico: En ausencia de un calibrador adecuado, se pueden utilizar factores teóricos, solo como orientativos. El cálculo con calibrador és el más adecuado.
    Cálculo: (A) Muestra ? (A) Blanco Muestra x Factor = mg/dL de bilirrubina
    Factor Bilirrubina Total: 13,8
    Factor Bilirrubina Directa: 10,4
    Factor de conversión: mg/dL x 17,1 = µmol/L.

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

  • Bilirrubina Total en adultos: Hasta 1,10 mg/dL ≅  18,81 µmol/L
  • Bilirrubina Total en recién nacidos  <12 mg/dL ≅ < 205,2 µmol/L
  • Bilirrubina Directa: Hasta 0,25 mg/dL ≅ 4,275 µmol/L

Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO

Rango de medida: Desde el límite de detección de (T) 0,0926 mg/dL (D) 0,0453 mg/dL hasta el límite de linealidad de 20 mg/dL (T y D).
Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con NaCl 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Precisión:

Bilirrubina T
Intraserie (n= 20) 
Interserie (n= 20)
Media (mg/dL) 
1,16
4,21
1,15
4,27
SD
0,02
0,04
0,02
0,13
CV (%)
2,03
1,06
1,91
3,10

 

Bilirrubina D
Intraserie (n= 20) 
Interserie (n= 20)
Media (mg/dL) 
0,78
2,28
0,80
2,18
SD
0,01
0,01
0,01
0,03
CV(%)
1,28
0,65
1,63
1,53

Sensibilidad analítica: (T) 1 mg/dL = 0,07880 (A). (D) 1 mg/dL = 0,12772 (A).
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x). Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
BILIRRUBINA TOTAL
Coeficiente de correlación (r)2 : 0,9894.
Ecuación de la recta de regresión: y= 0,9832x + 0,0224.
BILIRRUBINA DIRECTA
Coeficiente de correlación (r)2 : 0,9867.
Ecuación de la recta de regresión: y= 0,9923x + 0,0048.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

La presencia de hemólisis disminuye el valor de bilirrubina.
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren con la determinación de la bilirrubina.

NOTAS

Para la determinación de bilirrubina en neonatos, pipetear 50 µL de muestra.
Multiplicar el resultado obtenido por 4.

CONTIENE

R1: 1×60 ml. / R2: 1×10 ml. / R3: 1×150 ml.

Información adicional

Peso 0,319 kg

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