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Bilirrubina directa DPD 1×240 mL / 1×60 mL

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🏷️ Caducidad: 1.76 años.
🔄 Reposición: 16 días.
⏳ Disponible bajo demanda.

22,74 €

Disponible para reserva

Referencia: 1001047

Descripción

Determinación cuantitativa de bilirrubina directa. IVD.
Conservar a 2-8ºC

PRINCIPIO DEL MÉTODO

La bilirrubina directa (conjugada) se combina con la sal de diazonio en presencia de un ácido sulfámico para formar el compuesto coloreado, azobilirrubina. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de bilirrubina presente en la muestra ensayada. El aumento de la absorbancia a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina directa. 

SIGNIFICADO CLÍNICO

La bilirrubina se origina por la degradación de la hemoglobina y existe en dos formas. La bilirrubina no conjugada se transporta al hígado, unida por la albúmina, donde se convierte en conjugada (directa) con el ácido glucurónico y se excreta. La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubina en plasma. Causas más probables de la hiperbilirrubinemia:
Bilirrubina Total: Aumento de la hemólisis, alteraciones genéticas, anemia neonatal, alteraciones eritropoyeticas, presencia de drogas.
Bilirrubina Directa: Colestasis hepática, alteraciones genéticas y alteraciones hepáticas. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

R 1
Ácido sulfámico  100mM
R 2
2,4-DPD  0,5mM
Ácido clorhídrico (HCl)  0,3 M

PRECAUCIONES

R1/R2:  H314-Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares.
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto.

PREPARACIÓN

Todos los reactivos están listos para su uso.

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita la contaminación durante su uso. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
– Presencia de partículas y turbidez.

MATERIAL ADICIONAL

  • Espectrofotómetro o analizador capaz de medir la absorbancia a 546 nm
  • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

Suero o plasma libre de hemólisis. Proteger de la luz.
Estabilidad de la muestra: 4 días a 2-8ºC o 2 meses a -20ºC.

PROCEDIMIENTO

  1. Condiciones del ensayo:
    1. Longitud de onda: ………………………………..…………546 nm (530-580)
    2. Cubeta:…………………………………………………………..1 cm paso de luz
    3. Temperatura: ………………………….…………………………………………37ºC
  2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
  3. Pipetear en una cubeta:
     
    Blanco Calibrador
    Blanco Muestra
    R 1 (µL)
    800
    800
    Calibrador (µL)
    50
    –
    Muestra (µL)
    –
    50

4. Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 37ºC.
5. Leer la absorbancia (A1) del calibrador y la muestra.
6. Añadir: 

 
Calibrador
Muestra
R 2 (µL)
200
200

7. Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 37ºC.
8. Leer la absorbancia (A2) del calibrador y la muestra frente al blanco de
reactivo.
9. Calcular el incremento de absorbancia: ΔA= A2–A1. 

CÁLCULOS

  • Con Calibrador:
    ((ΔA)Muestra / (ΔA)Calibrador) x Conc. Calibrador = mg/dL de bilirrubina en la muestra
  • Con Factor: (ΔA)Muestra x Factor* = mg/dL bilirrubina en la muestra
    *Factor: Concentración del Calibrador / (ΔA) Calibrador

    Factor de conversión: mg/dL x 17,1 = µmol/L

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

Bilirrubina Directa 0- 0,2 mg/dL (0 -3,42 µmol/L )
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO

Rango de medida: Desde el límite de detección de 0,03 mg/dL hasta el límite de linealidad de 9 mg/dL. Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con NaCl 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Precisión:

 
Interserie (n= 40)
Intraserie (n= 80)
Media (mg/dL)
0,7458
2,444
0,7458
2,444
SD
0,05868
0,0550
0,0276
0,024
CV (%)
7,9
2,2
3,7
1,0

Sensibilidad analítica:1 mg/dL = 0,040 Abs.
Exactitud: Los resultados obtenidos usando reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x) con el analizador Spintech 240. Los resultados obtenidos con 53 muestras con valores de entre 0,06 a 9 mg/dL (1,02 a 153,9 µmol/L) fueron los siguientes:
Coeficiente de correlación (r): 0,9986.
Ecuación de la recta de regresión: y= 1,0056 x – 0,1046
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

Las interferencias debidas a la hemólisis, lipemia y a. ascórbico se evaluaron para este método de bilirrubina directa en un analizador Spintech 240. Se evaluaron dos concentraciones de la bilirrubina directa. No se observaron interferencias para la lipemia (Intralipid) hasta 350 mg /dL y ácido ascórbico hasta 40 mg/L.
La hemólisis produce una interferencia considerable, por lo que no se deben emplear muestras hemolizadas.
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren con la determinación del bilirrubina.

NOTAS

 

1. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores.

CONTIENE

 

1×240 mL / 1×60 mL

Información adicional

Peso 0,383 kg

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