Ácido úrico 10×50 ml

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Referencia: 1001011

Descripción

Determinación cuantitativa de ácido úrico IVD.
Conservar a 2-8ºC

PRINCIPIO DEL MÉTODO

El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno (2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4- aminofenazona (4-AF) y 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un compuesto rosáceo:

                           Ácido úrico + 2H2 O + O Alantoína + CO2 + 2H2 O2

                                2H2 O2 + 4-AF + DCPS →Quinonaimina + 4H2 O

La intensidad de quinonaimina roja formada es proporcional a la concentración de ácido úrico presente en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

El ácido úrico y sus sales son el producto final del metabolismo de las purinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico. Niveles altos de ácido úrico son indicativos de patología renal y generalmente se asocia con la gota. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

REACTIVOS

R 1

Tampón

Fosfatos pH 7,4 50 mmol/L

2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) 4nmol/L

R 2

Enzimas

Uricasa 60 U/L

Peroxidasa (POD) 660 U/L

Ascorbato oxidasa 200 U/L

4 – Aminofenazona (4-AF) 1mmol/L

URIC ACID CAL
Patrón primario acuoso de Ácido úrico 6mg/dL

PREPARACIÓN

Reactivo de trabajo (RT): Disolver ( → ) el contenido de un vial de R 2 Enzimas en un frasco de R 1 Tampón. Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Estabilidad: 1 mes en nevera (2-8ºC) o 10 días a temperatura ambiente.

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

Indicadores de deterioro de los reactivos:

  • Presencia de partículas y turbidez.
  • Absorbancia (A) del blanco a 520 nm ≥ 0,16. 

MATERIAL ADICIONAL

  • Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 520 nm.
  • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

  • Suero o plasma : Estabilidad 3-5 días a 2-8ºC y 6 meses a -20ºC.
  • Orina (24 h): Estabilidad 3 días a temperatura ambiente a pH > 8. Diluir la muestra al 1/50 en agua destilada. Mezclar. Multiplicar el resultado obtenido por 50 (factor de dilución); Si la muestra es turbia, calentarla a 60ºC 10 min para disolver los precipitados de urato y ácido úrico. No refrigerar.

PROCEDIMIENTO

  1. Condiciones del ensayo:
    1. Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490-550)
    2. Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz
    3. Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 37ºC- / 15-25ºC
  2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
  3. Pipetear en una cubeta:
     
    Blanco
    Patrón
    Muestra
    RT (mL)
    1,0
    1,0
    1,0
    Patrón (µL)
    25
    Muestra (µL)
    25

4. Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC ó 10 min. 15-25ºC.
5. Leer la absorbancia (A) del Patrón y la muestra, frente al blanco de reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.

CÁLCULOS

Suero o plasma

((A) Muestra – (A) Blanco / (A) Patrón – (A) Blanco) x 6 (Conc. Patrón) = mg/dL de ácido úrico en la muestra

Orina 24 h

((A) Muestra – (A) Blanco / (A) Patrón – (A) Blanco) x 6 x vol.(dL) orina/24h = mg/24h de ácido úrico

Factor de conversión: mg/dL x 59,5= µmol/L.

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

  • Suero o plasma:
    • Mujeres: 2,5 – 6,8 mg/dL ≅ 149 – 405 µmol/L
    • Hombres: 3,6 – 7,7 mg/dL ≅ 214 – 458 µmol/L
  • Orina: 250 – 750 mg/24h ≅ 1,49 – 4,5 mmol/24 h

Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO

Rango de medida: Desde el límite de detección de 0,00 mg/dL hasta el límite de linealidad de 40 mg/dL.
Si la concentración es superior al límite de linealidad, diluir la muestra 1/2 con NaCI 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.

Precisión:

 
Intraserie (n=20)
Interserie (n=20)
Media (mg/dL)
4,74
10,55
4,73
10,50
SD
0,02
0,03
0,13
0,29
CV (%)
0,50
0,30
2,67
2,77

Sensibilidad analítica: 1 mg/dL = 0,02930 A.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Coeficiente de correlación (r)2 : 0,97137.
Ecuación de la recta de regresión: y=1,162x + 0,14156.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

No se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 µmol/L, hemoglobina hasta 130 mg/dL y ácido ascórbico hasta 570 µmol/L .
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación del ácido úrico.

NOTAS

  1. URIC ACID CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
  2. La calibración con el Patrón acuoso puede dar lugar a errores sistemáticos en métodos automáticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores séricos.
  3. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación.
  4. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores.

CONTIENE

R1: 10 x 50 mL, R2:10 → 50 mL, CAL: 1 x 5 mL

Información adicional

Peso 0,85 kg

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