04/02/16Intraserie (n=20) Interserie (n=20)Media (mg/dL)SDCV (%)4,740,020,5010,550,030,304,730,132,6710,500,292,77Rango de medida: Desde el límite de detección de 0,00 mg/dL hasta ellímite de linealidad de 40 mg/dL.Si la concentración es superior al límite de linealidad, diluir la muestra 1/2con NaCI 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.Precisión:Ácido úricoUricasa -POD. Enzimático colorimétricoBSIS01-EURIC ACIDDeterminación cuantitativa de ácido úricoIVDConservar a 2-8ºCPRINCIPIO DEL MÉTODOEl ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido dehidrógeno (2H 2 O 2 ) que en presencia de peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma uncompuesto rosáceo:Ácido úrico + 2H 2 O + O 2 Alantoína + CO 2 + 2H 2 O 22H 2 O 2 + 4-AF + DCPS Quinonaimina + 4H 2 OLa intensidad de quinonaimina roja formada es proporcional a laconcentración de ácido úrico presente en la muestra ensayada 1,2 .SIGNIFICADO CLÍNICOEl ácido úrico y sus sales son el producto final del metabolismo de laspurinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención ensangre de urea, creatinina y ácido úrico.Niveles altos de ácido úrico son indicativos de patología renal ygeneralmente se asocia con la gota 1,5,6 .El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos losdatos clínicos y de laboratorio.REACTIVOSFosfatos pH 7,42-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS)TampónEnzimasUricasaPeroxidasa (POD)Ascorbato oxidasa4 – Aminofenazona (4-AF)50 mmol/L4 mmol/L60 U/L660 U/L200 U/L1 mmol/LR 1R 2URIC ACID CAL Patrón primario acuoso de Ácido úrico 6 mg/dLPREPARACIÓNReactivo de trabajo (RT): Disolver ( ) el contenido de un vial de R 2Enzimas en un frasco de R 1 Tampón. Tapar y mezclar suavementehasta disolver su contenido. Estabilidad: 1 mes en nevera (2-8ºC) o10 días a temperatura ambiente.CONSERVACIÓN Y ESTABILIDADTodos los componentes del kit son estables, hasta la fecha decaducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascosbien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita sucontaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.Indicadores de deterioro de los reactivos:– Presencia de partículas y turbidez.– Absorbancia (A) del blanco a 520 nm 0,16.MATERIAL ADICIONAL– Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 520 nm.– Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.– Equipamiento habitual de laboratorio.MUESTRAS– Suero o plasma 1 : Estabilidad 3-5 días a 2-8ºC y 6 meses a –20ºC.– Orina (24 h) 1 : Estabilidad 3 días a temperatura ambiente a pH > 8.Diluir la muestra al 1/50 en agua destilada. Mezclar. Multiplicar elresultado obtenido por 50 (factor de dilución); Si la muestra esturbia, calentarla a 60ºC 10 min para disolver los precipitados deurato y ácido úrico. No refrigerar.PROCEDIMIENTO1. Condiciones del ensayo:Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .520 nm (490-550)Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luzBlanco Patrón MuestraRT (mL) 1,0 1,0 1,0Patrón (Nota1,2,3) (μL) — 25 —Muestra (μL) — — 254. Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC ó 10 min. 15-25ºC.5. Leer la absorbancia (A) del Patrón y la muestra, frente alblanco de reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.CÁLCULOSSuero o plasmax 6 (Conc. Patrón) = mg/dL de ácido úrico en la muestraOrina 24 hx 6 x vol. (dL) orina/24h = mg/24 h de ácido úricoFactor de conversión: mg/dL x 59,5= μmol/L.CONTROL DE CALIDADEs conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisarel instrumento, los reactivos y el calibrador.Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecercorrecciones en el caso de que los controles no cumplan con lastolerancias.VALORES DE REFERENCIA 5Suero o plasma:Mujeres 2,5 – 6,8 mg/dL 149 – 405 μmol/LHombres 3,6 – 7,7 mg/dL 214 – 458 μmol/LOrina: 250 – 750 mg/24 h 1,49 – 4,5 mmol/24 hEstos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorioestablezca sus propios valores de referencia.CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODOSensibilidad analítica:Exactitud:1 mg/dL = 0,02930 A.Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferenciassistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivoscomerciales (x).Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:Coeficiente de correlación (r) 2 : 0,97137.Ecuación de la recta de regresión: y=1,162x + 0,14156.Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.INTERFERENCIASNo se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 μmol/L,hemoglobina hasta 130 mg/dL y ácido ascórbico hasta 570 μmol/L 2 .Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en ladeterminación del ácido úrico 3,4 .NOTAS1. URIC ACID CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejabletratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.2. La calibración con el Patrón acuoso puede dar lugar a erroressistemáticos en métodos automáticos. En este caso, se recomiendautilizar calibradores séricos.3. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensación.4. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicaciónde este reactivo en distintos analizadores.BIBLIOGRAFÍA1.2.3.4.5.6.Schultz A. Uric acid. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.Princeton 1984; 1261-1266 and 418.Fossati P et al. Clin Chem 1980;26:227-231.Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.PRESENTACIÓNUricasaPOD(Nota 3)Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 37ºC / 15-25ºC–2.3. Pipetear en una cubeta :Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.Ref: 1001010Ref: 1001011Ref: 1001012R1: 10 x 20 mL, R2:10 20 mL, CAL: 1 x 5 mLR1: 10 x 50 mL, R2:10 50 mL, CAL: 1 x 5 mLR1: 4 x 125 mL, R2:4 125mL, CAL: 1 x 5 mLCont.Ref: 1001013 R1: 4 x 250 mL, R2:4 250mL, CAL: 1 x 5 mLBlanco)A(Patrón –)A(Blanco)A(Muestra –)A(Blanco)A(Patrón –)A(Blanco)A(Muestra –)A(SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAINTel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com | www.spinreact.com
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