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GPT/ALT 10×15 ml

Determinación cuantitativa de alanina aminotransferasa GPT (ALT). IVD.
Conservar a 2-8 ºC.

28,71 €

2 disponibles (puede reservarse)

Referencia: 1001171

Descripción

PRINCIPIO DEL MÉTODO

La alanina aminotransferasa (ALT), inicialmente llamada transaminasa glutámico pirúvica (GPT), cataliza la transferencia reversible de un grupo amino de la alanina al α-cetoglutarato, con formación de glutamato y piruvato. El piruvato producido es reducido a lactato en presencia de lactato deshidrogenasa (LDH) y NADH.

La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinada fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de ALT en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La ALT es una enzima intracelular, se encuentra principalmente en las células del hígado y el riñón. Su mejor aplicación es en el diagnóstico de las enfermedades del hígado. Se observan niveles elevados en enfermedades hepáticas como la hepatitis, enfermedades de los músculos y traumatismos. Cuando se emplean en conjunción con la AST, ayuda en el diagnóstico de infartos de miocardio, ya que el valor de la ALT se mantiene dentro de los límites normales y aumenta en los niveles de AST.

El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

 

Descripción Concentración
R1: Tampón TRIS pH 7,8 100 mmol/L, L-Alanina 500 mmol/L
R2: Substrato NADH 0,18 mmol/L, LDH 1200 U/L, α-Cetoglutarato 15 mmol/L
PREPARACIÓN

Reactivo de trabajo (RT):

    • Ref: 1001171 Disolver un comprimido de R2 Substrato en 15 mL de R1.

Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 72 horas a temperatura ambiente (15-25ºC).

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. No usar las tabletas si aparecen fragmentadas. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

Indicadores de deterioro de los reactivos:

    • Presencia de partículas y turbidez.
    • Absorbancia en Blanco a 340 nm < 1,00.
MATERIALES ADICIONALES
    • Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
    • Baño termostatizable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC).
    • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
    • Equipo habitual de laboratorio.
MUESTRAS

Suero o plasma. Estabilidad de la muestra: 7 días a 2-8ºC.

PROCEDIMIENTO
    1. Condiciones del ensayo:
      1. Longitud de onda: 340 nm
      2. Cubeta: 1 cm paso de luz
      3. Temperatura constante: 25ºC / 30ºC / 37ºC
    2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
    3. Pipetear en una cubeta RT (mL) 1,0, Muestra (μL) 100.
    4. Mezclar e incubar 1 minuto.
    5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
    6. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto (ΔA/min).
CÁLCULOS

ΔA/min x 1750 = U/L de ALT

Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 µmol de sustrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).

Factores de conversión de temperaturas:

  Factor para convertir a
Temperatura de medición 25ºC 30ºC 37ºC
25ºC
1,00
0,76
0,55
30ºC
1,32
1,00
0,72
37ºC
1,82
1,39
1,00
CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210). Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica. Cada laboratorio debe disponer de su propio Control de Calidad y establecer correcciones en caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

 

Género 25ºC 30ºC 37ºC
Hombres
Hasta 22 U/L
29 U/L
40 U/L
Mujeres
Hasta 18 U/L
22 U/L
32 U/L

En recién nacidos normales se han descrito valores de referencia hasta el doble del de los adultos, debido a su inmadurez hepática. Estos valores se normalizan aproximadamente a los tres meses. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO

Rango de medida: Desde el límite de detección 0 U/L hasta el límite de linealidad de 400 U/L. Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/10 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.

Precisión:

  Intraserie (n=20) Interserie (n=20)
Media (U/L)
42
112
41
111
SD
0,47
0,96
0,79
2,21
CV (%)
1,12
0,85
1,90
1,98

 

Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,000503 ΔA/min.

Exactitud: Los reactivos SPINREACT no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales.

Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:

Coeficiente de regresión (r2): 0,9869.

Ecuación de la recta de regresión: y = 1,0589x – 0,6075. Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

Los anticoagulantes de uso corriente como la heparina, EDTA, oxalato o fluoruro no afectan los resultados. La hemólisis interfiere con la determinación. Se han descrito varias drogas y otras sustancias que interfieren en la determinación de la ALT.

NOTAS

SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores.

PRESENTACIÓN

Ref: 1001171 R1: 1 x 150 mL, R2: 10 x 15 mL

GPTALT 20x2 ml

Información adicional

Peso 0,283 kg

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