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Determinación cuantitativa de fosfatasa alcalina (FAL). IVD.Conservar a 2-8ºC.
Disponible para reserva
PRINCIPIO DEL MÉTODO
Test fotométrico cinético, acorde a la International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicines (IFCC). La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza la tranferencia del grupo fosfato desde el p-nitrofenilfosfato (pNPP) al 2-amino-2-methyl-1-propanol liberando pnitrofenol y fosfato, según la siguiente reacción:
p-Nitrofenilfosfato +AMP FAL→ p-Nitrofenol + Fosfato
La velocidad de formación del p-Nitrofenol, determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de fosfatasa alcalina en la muestra ensayada.
SIGNIFICADO CLÍNICO
Las fosfatasas alcalinas son enzimas que se encuentran presentes en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente alta en huesos, hígado, placenta, intestinos y riñón.
Tanto el aumento como la disminución de los niveles en plasma, tienen significado clínico.
Causas más probables de aumento del nivel de FAL:
Enfermedad ósea de Paget, obstrucciones hepáticas, hepatitis, hepatotoxicidad por medicamentos y osteomalacia.
Causas más probables de disminución del nivel de FAL:
Cretinismo y déficit de vitamina C.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
R 1 Tampón |
2-Amino-2-metil-1-propanol
Zinc sulfato Magnesio acetato N-ácido hidroxietiletilenediaminotriacetico (EDTA) |
0,35 mol/L
1 mmol/L 2 mmol/L 2 mmol/L |
R 2 Sustrato
|
p-Nitrofenilfosfato (pNPP)
|
10 mmol/L
|
PREPARACIÓN
Reactivo de trabajo (RT): Mezclar:
1 vol. de (R2) Substrato + 4 vol. (R1) Tampón.
Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 5 días a temperatura ambiente.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2- 8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. No congelar.
No usar las tabletas si aparecen fragmentadas.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
MATERIAL ADICIONAL
MUESTRAS
Suero o plasma heparinizado.
Suero libre de hemólisis, separado de los hematies lo antes posible.
Estabilidad: 3 días a 2-8ºC.
PROCEDIMIENTO
RT (mL) |
1,0 |
---|---|
Muestra (µL) |
20
|
CÁLCULOS
ΔA/min x 2764= U/L de FAL
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 µmol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).
Factores de conversión de temperaturas
Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
Temperatura de medición |
Factor para convertir a | ||
---|---|---|---|
25ºC | 30ºC | 37ºC | |
25ºC |
1,00
|
1,22
|
1,64
|
30ºC
|
0,82
|
1,00
|
1,33
|
37ºC
|
0,61
|
0,75
|
1,00
|
CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
VALORES DE REFERENCIA
|
25ºC | 30ºC | 37ºC |
---|---|---|---|
Adultos |
17 – 77 U/L
|
21 – 94 U/L
|
26 – 117 U/L
|
Factores que pueden afectar los valores de referencia son: ejercicio, periodos de crecimiento en niños y embarazo.
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Rango de medida: Desde el límite de detección 1,307 U/L hasta el límite de linealidad 1400 U/L.
Precisión:
Intraserie (n= 20) | Interserie (n= 20) | |||
---|---|---|---|---|
Media (U/L)) |
73 |
194
|
78
|
209
|
SD |
1,67
|
3,03
|
2,13
|
4,90
|
CV (%) |
2,27
|
1,58
|
2,72
|
2,34
|
Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,0004 ΔA/min.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Coeficiente de regresión (r): 0,98929.
Ecuación de la recta de regresión: y= 2,214x + 2,131.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
INTERFERENCIAS
El fluoruro, oxalato, citrato y EDTA inhiben la actividad de la fosfatasa alcalina, por lo que no deben ser utilizados como anticoagulantes.
La hemólisis interfiere debido a la elevada concentración de fosfatasa alcalina en los hematies. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la fosfatasa alcalina
NOTAS
SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores.
CONTIENE
R1: 1 x 60 mL
R2:1 x 15 mL
BEIS01-E 19/03/15
Marca | Spinreact |
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