CK-NAC líquida IFCC 125 ml

Para la determinación in vitro de la Creatin Quinasa en suero o plasma.

73,65 

2 disponibles (puede reservarse)

Referencia: 997974

Descripción

PRINCIPIO DEL TEST

La creatin quinasa sérica (CK) libera la creatina del sustrato fosfocreatina en presencia del cofactor ADP que pasa a ATP. El ATP formado, en presencia de glucosa, reacciona mediante la acción de la hexokinasa dando lugar a la formación de glucosa-6-fostato, que es degradada a fosfogluconato por acción de la glucosa-6-fosfato-deshidrogensa mientras que el cofactor NADP+ se reduce a NADPH, con el consiguiente cambio en la Abs del sistema.

En condiciones óptimas de reacción, la ΔAbs/min es proporcional a la concentración de enzima creatin quinasa presente en la muestra.

CK
fosfocreatina + ADP → creatina + ATP

HK
ATP + glucosa→ glucosa-6-fosfato + ADP

G-6-PDH
glucosa-6-fosfato + NADP+ → 6-fosfogluconato + NADPH + H+

UTILIDAD DIAGNÓSTICA

La mayoría de los casos de aumento de los valores de la CK están relacionados con enfermedades del músculo esquelético o del corazón. Se encuentran valores superiores a los habituales después de traumatismos, cirugía, trastornos miopáticos, infartos de miocardio, hipotermia prolongada o hipotiroidismo. También en casos de síndrome de Reye o de enfermedad de Duchenne. Los valores inferiores a los de referencia pueden reflejar una vida sedentaria o la presencia de masa muscular escasa.

Una única prueba de laboratorio no permite establecer un diagnóstico. Los resultados se han de evaluar en el contexto de todos los datos clínicos y de laboratorio obtenidos.

REACTIVOS

1 x 100 mL Disolución tampón Ref. 994910
1 x 25 mL Sustrato Ref. 996918

PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO

Los reactivos están listos para su uso.

En caso de que se quiera trabajar como Monorreactivo: mezclar los volúmenes deseados, pero manteniendo la proporción 4 partes de A (Disol. tampón) + 1 parte de B (Sustrato).

COMPOSICIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO

Las concentraciones en la disolución reactiva son:

Tampón Imidazol/Ac. acético pH 6,7 120 mM.
Glucosa 23 mM.
Fosfocreatina 36 mM.
Mg2+ 12 mM.
ADP 3 mM.
AMP 7 mM.
N-acetilcisteína 21 mM.
NADP+ 2.2 mM.
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa ≥ 3.500 U/l.
Hexoquinasa ≥ 7.500 U/l.
Estabilizantes y conservantes.

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Los componentes del kit almacenados 2-8ºC, son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
Una vez mezclados los componentes A y B, la disolución monorreactiva es estable 2 semanas mantenida a 2-8ºC o a temperatura ambiente (≤ 25ºC), protegido de la luz.

Indicaciones de alteración de los reactivos:
Presencia de turbidez o de partículas.
Blanco del reactivo de trabajo ≥ 0,800.

MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO

Material común de laboratorio.
Espectrofotómetro, analizador automático o fotómetro termostatizado a 37ºC.
Cubeta de 1 cm de paso de luz.

MUESTRA

Suero o plasma con heparina o EDTA. La hemólisis ligera no interfiere en la prueba.
La muestra es estable 1 semana a 2-8ºC.

PRECAUCIONES

Los reactivos contienen azida sódica al 0,09%, manipular con precaución.

Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. El calibrador debe considerarse como una muestra humana y por lo tanto potencialmente infeccioso. Utilizar protección adecuada.

Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo.

La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa local vigente.

CONTROL DE CALIDAD

Es recomendable la inclusión de sueros control, Seriscann Normal (Ref. 994148) y Seriscann Anormal (Ref. 994685) en cada proceso de medida para verificar los resultados.

Se aconseja que cada laboratorio establezca su propio programa de control de calidad y los procedimientos de corrección de las desviaciones detectadas.

AUTOANALIZADORES

Adaptaciones a distintos analizadores automáticos están disponibles bajo demanda.

PROCEDIMIENTO

Llevar el reactivo de trabajo y el instrumento a la temperatura de trabajo.

Técnica Monorreactivo 37ºC
(μL)

Birreactivo 37ºC
(μL)

Reactivo de trabajo
1.000
Disol. Tampón (A)
1.000
Muestra
40
50
Mezclar e incubar 1 min
Sustrato tamponado (B)
250

Mezclar y poner en marcha el cronómetro.
A los 3 minutos anotar la Abs inicial y leer las Abs. después de 1,2,3 y 4 min.
Determinar la ΔAbs/min promedio de las lecturas.

Lectura:
Longitud de onda: 365 nm; 340 nm: 334 nm.
Blanco: Agua.
Cubeta: termostatizada, 1 cm de paso de luz.

CÁLCULOS
Se utiliza la fórmula indicada para obtener el factor para calcular las U/L:

ΔAbs/min x Vt x 106 / Є x l x Vs= U/L

Donde:
Vt: Volumen total de la mezcla de reacción.
Vs: Volumen de muestra.
l: Paso de luz de la cubeta.
Є: Coeficiente de extinción molar de NADPH:

365 nm: 3,53 x 103
340 nm: 6,31 x 103
334 nm: 6,17 x 103

Determinar la ΔAbs/min promedio y multiplicar por el factor:

U/L = (ΔAbs365 nm/min) x 7429
U/L = (ΔAbs340 nm/min) x 4127
U/L = (ΔAbs334 nm/min) x 4207

VALORES DE REFERENCIA

Temperatura de reacción
Hombres
Mujeres
25ºC
19-70 U/L
14-60 U/L
30ºC
29-108 U/L
21-91 U/L
37ºC
46-171 U/L
34-145 U/L

Los valores indicados son a título orientativo. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

Conversión de unidades al sistema SI: Creatin Quinasa (U/L)x 0,017= Creatin Quinasa (μkat/L)

PRESTACIONES. CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO

Las características de funcionamiento del producto dependen tanto del reactivo como del sistema de lectura manual o automático empleados.

Los siguientes datos se han obtenido en un analizador automático a 37ºC y 340 nm:
Sensibilidad, como límite de detección: 2 U/L.
Linealidad: Hasta 1500 U/L. Para valores superiores debe diluirse la muestra 1/10 con disolución salina (NaCl 0,9%) y repetir el ensayo. Multiplicar el resultado por 10.
Exactitud, como % de recuperación: 103%.
Precisión en la serie como Coeficiente de Variación: 1,8%.
Precisión entre series como Coeficiente de Variación: 3,5%.
Veracidad: Los resultados obtenidos con el reactivo no presentan diferencias significativas al compararlo con el reactivo considerado de referencia.

Los datos detallados del estudio de las prestaciones del reactivo están disponibles bajo demanda.

INTERFERENCIAS

Sueros muy hemolizados interfieren en el ensayo.

No hay interferencia por la glucosa hasta 600 mg/dL, por ácido ascórbico hasta 40 mg/dL, ni por hemoglobina hasta 500 mg/dL.

CONTIENE

A. 1 x 100 mL Disolución tampón.
B. 1 x 25 mL Sustrato

PRO4_REG9_SHOR_2A

Fabricado por Química Clínica Aplicada

Información adicional

Peso 0,174 kg

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