CK-NAC 20×2,5 ml

Determinación cuantitativa de creatina quinasa (CK). IVD.NAC. Cinético UV.Conservar a 2-8ºC.

56,71 

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SKU: 1001050
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Descripción

PRINCIPIO DEL MÉTODO

La creatina quinasa (CK) cataliza la transferencia reversible de un grupo fosfato de la fosfocreatina al ADP. Esta reacción se acopla con otras catalizadas por la hexoquinasa (HK) y por la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6F-DH):

Fosfocreatina + ADP CK→ Creatina + ATP

ATP + Glucosa HK→ ADP + Glucosa-6-fosfato

Glucosa-6-fosfato + NADP+ G6F-DH→ 6-Fosfogluconato + NADPH + H+

La velocidad de formación de NADPH, determinado fotometricamente, es proporcional a la concentración catalítica de CK en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La creatina quinasa es una enzima intracelular, distribuida por todo el organismo humano. Su función fisiológica está asociada con la adenosina trifosfato (ATP) producida cuando el músculo se contrae.

El nivel de CK en suero esta elevado en pacientes con alteraciones del músculo esquelético y en infartos de miocardio. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

R1 Tampón
Imidazol pH 7,0
Glucosa
Acetato de magnesio
EDTA
100 mmol/L
20 mmol/L
10 mmol/L
2 mmol/L
R2 Substrato
ADP
AMP
di-Adenosina-5- pentafosfato
NADP+
Hexoquinasa (HK)
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6F-DH)
N-acetilcisteína
Fosfato de creatina
2 mmol/L
5 mmol/L
10 mmol/L
2 mmol/L
2500 U/L
1500 U/L
20 mmol/L
30 mmol/L

Opcional CK-Nac / CK-MB CONTROL: Suero humano liofilizado Ref: 1002260.

PRECAUCIONES

R1: H360-Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto.

PREPARACIÓN

Reactivo de trabajo (RT):
Ref: 1001050 Disolver (→) un comprimido de R2 en un vial de R1.
Ref: 1001051 Disolver (→) un comprimido de R2 en 15 mL de R1.

Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.

Estabilidad: 5 días a 2-8ºC o 24 horas a temperatura ambiente (15-25ºC).

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.

No usar las tabletas si aparecen fragmentadas.

No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

Indicadores de deterioro de los reactivos:

  • Presencia de partículas y turbidez.
  • Absorbancias del Blanco a 340 nm ≥ 1,00.

MATERIAL ADICIONAL

Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
Baño termostable a 25ºC, 30ºC ó 37º C ( 0,1ºC).
Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

Suero o plasma.

Estabilidad: 7 días a 2-8ºC, protegida de la luz. La actividad de la creatin quinasa disminuye un 10% tras 1 día a 2-5ºC ó tras 1 hora a 15-25ºC.

PROCEDIMIENTO

  1. Condiciones del ensayo:
    Longitud de onda: 340 nm.
    Cubeta: 1 cm paso de luz.
    Temperatura constante: 25ºC / 30ºC / 37ºC.
  2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
  3. Pipetear en una cubeta:
      25-30ºC 37ºC
    RT (mL)
    1,0
    1,0
    Muestra (µL)
    40
    20
  4. Mezclar, incubar 2 minutos.
  5. leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
  6. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto (ΔA/min).

CÁLCULOS

25º- 30ºC ΔA/min x 4127 = U/L CK

37ºC ΔA / min x 8095 = U/L CK

Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).

Factores de conversión de temperaturas
Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:

Temperatura de medición  Factor para convertir a
25ºC 30ºC 37ºC
25ºC
1,00
1,56
2,44
30ºC
0,64
1,00
1,56
37ºC
0,41
0,63
1,00

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).

Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.

Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

 
25ºC 30ºC 37ºC
Hombres, hasta
80 U/L
130 U/L
195 U/L
Mujeres, hasta
70 U/L
110 U/L
170 U/L

Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO

Rango de medida: Desde el límite de detección 0,878 U/L hasta el límite de linealidad 1300 U/L.

Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/10 con NaCl 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.

  Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Media (U/L)
144
478
146
494
SD
3,88
6,98
4,55
9,57
CV (%)
2,69
1,49
3,11
1,94

Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,0001 ΔA/min.

Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).

Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Coeficiente de regresión (r)2: 0,997.
Ecuación de la recta de regresión: y= 1,031x – 0,5355.

Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

No se ha observado interferencia de la bilirrubina hasta 20 mg/dL y hemoglobina hasta 10 g/L.

Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la Creatina quinasa.

NOTAS

SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores.

CONTIENE

R1: 20 x 2,5 mL, R2: 20 → 2,5 mL

BEIS02-E 22/05/15

Información adicional

Peso 0,302 kg
Marca

Spinreact

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