CK-MB 6×2.5 ml

Determinación cuantitativa de creatina quinasa-MB (CK-MB). IVD.Conservar a 2-8ºC.

40,52 

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SKU: 1001054
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Descripción

PRINCIPIO DEL MÉTODO

El anticuerpo anti CK-M inhibe completamente la actividad de la CK-MM y la subunidad (M) de la CK-MB. La actividad de la CK-B no inhibida se determina según las siguientes reacciones:

Fosfocreatina + ADP ___CK__→ Creatina + ATP

ATP + Glucosa ___HK__→ ADP + Glucosa-6-fosfato

Glucosa-6-fosfato + NADP+ ___G6F-DH__→ 6-Fosfogluconato + NADPH + H+

La velocidad de formación de NADPH, determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de CK-B en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La CK-MB es una enzima compuesta de dos subunidades, la subunidad M expresada en el músculo y la subunidad B, expresada en las células nerviosas.

La CK-MB se encuentra en el suero en concentraciones bajas, se incrementa como consecuencia de un infarto de miocardio y después desciende a niveles normales. Puede incrementarse, más raramente, en traumatismos del músculo esquelético5,6. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

R 1
Tampón
Imidazol pH 6,7 100 mmol/L
Glucosa 20 mmol/L
Acetato de magnesio 10 mmol/L
EDTA 2 mmol/L
R 2
Anti CK-M
*Anti CK-M 2000 U/L
ADP 2 mmol/L
AMP 5 mmol/L
di-Adenosina-5- pentafosfato 10 mmol/L
NADP+ 2 mmol/L
Hexoquinasa (HK) 2500 U/L
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6F-DH) 1500 U/L
N-acetilcisteína 20 mmol/L
Fosfato de creatina 30 mmol/L

*Anti CK-M suficiente para inhibir hasta 2000 U/L de CK – MM

Opcional

CK-Nac / CK-MB CONTROL
Suero humano liofilizado Ref: 1002260

PRECAUCIONES

R1: H360-Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto.

Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto.

CK-NAC / CK-MB CONTROL Todos los componentes de origen humano han resultado ser negativos para el antígeno HBs, HCV y para el anti-HIV (1/2). Sin embargo, deben tratarse con precaución como potencialmente infecciosos.

PREPARACIÓN

Reactivo de trabajo (RT):
Disolver ( → ) un comprimido de R2 en un vial de R1. Tapar el vial y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.
Estabilidad: 8 días a 2-8ºC o 24 horas a 15-25ºC.

CK-Nac / CK-MB CONTROL:
Reconstituir ( → ) el contenido de un vial con 2 mL de agua destilada. Tapar el vial y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.
Estabilidad: 5 días a 2-8ºC o 4 semanas a -25ºC – -15ºC.

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.

No usar las tabletas si aparecen fragmentadas.

No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

Indicadores de deterioro de los reactivos:

  • Presencia de partículas y turbidez.
  • Absorbancias (A) del Blanco a 340nm ≥ 1,6.

MATERIAL ADICIONAL

  • Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340nm.
  • Baño termostable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC).
  • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

Suero o plasma. Estabilidad: 7 días a 2-8ºC, protegida de la luz.

La actividad de la CK-MB en el suero disminuye un 10% tras 24 horas a 4ºC o tras 1 hora a 25ºC.

PROCEDIMIENTO

Condiciones del ensayo:

  • Longitud de onda: 340nm.
  • Cubeta: 1 cm paso de luz.
  • Temperatura constante 25ºC / 30ºC / 37ºC.

Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.

Pipetear en una cubeta:

RT (mL)
1,0
Muestra (μL)
40

Mezclar. Incubar 10 minutos.

Leer la absorbancia (A1) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia de nuevo a los 5 minutos (A2).

Calcular la diferencia de absorbancias: ΔA= A2 – A1.

CÁLCULOS

ΔA x 825 = U/L de CK-B

ΔA x 1651 = U/L de CK-MB

El factor de cálculo en analizadores automáticos por método cinético (ΔA/min) es 8255 de CK-MB.

Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 ?mol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).

Porcentaje de actividad de la CK-MB:

(Actividad de la CK-MB / Actividad de laCK Total) x 100 = % de actividad de la CK-MB

Factores de conversión de temperaturas

Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:

Temperatura
de medición
Factor para convertir a
25ºC
30ºC
37ºC
25ºC
1,00
1,53
2,38
30ºC
0,65
1,00
1,56
37ºC
0,42
0,64
1,00

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente utilizar controles de sueros específicos CK-Nac/CK-MB (Ref. 1002260).

Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.

Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

La probabilidad de un infarto de miocardio es elevada en las siguientes condiciones:

 
25ºC
30ºC
37ºC
CK-MB
> 10 U/L
> 15 U/L
> 24 U/L

La actividad de la CK-MB se encuentra entre 6 y 25% de la actividad total de la CK. Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO

Rango de medida: Límite de detección: 3,11 U/L.

Linealidad: Antes de efectuar la determinación de CK-MB, se determinará la actividad de CK Total mediante el método CK-NAC activado. Si la actividad de CK es superior a 1000 U/L, las muestras, para la determinación de CK-MB, deberán diluirse a 1:2 con NaCL al 0.9 % y multiplicar el resultado calculado por 2.

Precisión:

 
Intraserie (n= 20)
Interserie (n= 20)
Media (U/L)
54,2
138,3
55,7
141,6
SD
1,45
1,33
1,62
1,39
CV (%)
2,67
0,96
2,92
0,98

Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,00029 ΔA / min.

Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x). Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:

Coeficiente de regresión (r)2: 0,996.
Ecuación de la recta de regresión: y= 0,9919x – 0,1042.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

Las muestras extremadamente hemolizadas interfieren en el ensayo. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la CK-MB.

PRESENTACIÓN

R1: 6 x 2,5 mL, R2: 6 → 2,5 mL

BEIS04-E 10/12/15

Fabricado por Spinreact

Información adicional

Marca

Spinreact

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