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Amilasa líquida 2×60 ml
Determinación cuantitativa de amilasa (AMS). IVD.Conservar a 2-8ºC.
63,44 €
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Descripción
PRINCIPIO DEL MÉTODO
La α-amilasa hidroliza el 2-cloro-4-nitrofenil-α-D-maltotriósido (CNPG3) a 2-cloro-4-nitrofenol (CNP) y forma 2-cloro-4-nitrofenil-α-Dmaltoside (CNPG2), maltotriosa (G3) y glucosa (G), según la siguiente reacción:
10 CNPG3 _Amilasa→ 9 CNP + 1 CNPG2 + G3 + G
La velocidad de formación de 2-cloro-4-nitrofenol, determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de α- amilasa en la muestra ensayada.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La α-amilasa (AMS) es una enzima que ayuda a digerir el glucógeno y el almidón. Se produce principalmente en las glándulas salivales y el páncreas exocrino. Su determinación se realiza principalmente para diagnosticar o controlar enfermedades del páncreas como pancreatitis crónica o aguda. Puede reflejar también enfermedad de la vesícula biliar, algunos problemas gastrointestinales y otros trastornos.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
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R |
MES pH 6,0 100 mmol/L
CNPG3 2,25 mmol/L Cloruro sódico 350 mmol/L Acetato cálcico 6 mmol/L Tiocianato potásico 900 mmol/L Ácida sódica 0,95 gr/L |
PREPARACIÓN
Reactivo listo para su uso.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Una vez abierto el reactivo es estable 60 días, si se cierra inmediatamente después de su uso y se conserva a 2-8ºC.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
- Presencia de partículas y turbidez.
- Absorbancia del Blanco a 405 nm ≥ 0,40.
MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405 nm.
- Baño termostatizable a 37ºC.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio.
MUESTRAS
Suero o plasma, separado lo antes posible de los hematíes. Como anticoagulante se recomienda la heparina.
Orina, ajustar el pH aproximadamente a 7,0 antes de conservar.
Estabilidad: 1 mes a 2-8ºC.
PROCEDIMIENTO
Condiciones del ensayo:
- Longitud de onda: 405 nm.
- Cubeta: 1 cm paso de luz.
- Temperatura constante: 37ºC
Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
Pipetear en una cubeta:
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|
Suero o plasma
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Orina
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R (mL)
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1,0
|
1,0
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Muestra (µl)
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20
|
10
|
Mezclar, incubar 30 segundos.
Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto (ΔA/min).
CÁLCULOS
Suero o plasma ΔA/min x 3954 = U/L AMS
Orina ΔA/min x 7908 = U/L AMS
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).
Factor de conversión: U/L x 0,01667 = µkat/L.
CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
VALORES DE REFERENCIA
Suero o plasma: Hasta 90 U/L de α-amilasa.
Orina: Hasta 450 U/L de α-amilasa.
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Rango de medida: Desde el límite de detección 0,2439 U/L hasta el límite de linealidad 2200 U/L.
Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con NaCl 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Precisión:
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Intraserie (n= 20)
|
Interserie (n= 20)
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||
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Media
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77
|
194
|
77
|
197
|
|
SD
|
1,12
|
2,22
|
1,08
|
2,96
|
|
CV (%)
|
1,45
|
1,15
|
1,39
|
1,50
|
Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,00025 ΔA/min.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Los resultados obtenidos fueron los siguientes:
Coeficiente de regresión (r)2: 0,98628.
Ecuación de la recta de regresión: y=0,746x – 1,2697.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
INTERFERENCIAS
La hemólisis interfiere en los resultados. La actividad -amilasa puede ser inhibida por agentes quelantes como citrato y EDTA.
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la -amilasa.
NOTAS
La α-amilasa es temperatura-dependiente, los ensayos realizados a temperaturas <37ºC o >37ºC pueden variar los resultados.
La saliva y el sudor contienen α-amilasa. Evitar el pipeteo con la boca y el contacto de la piel con el reactivo o material empleado.
Contiene tiocianato potásico. Evitar inhalación o contacto del reactivo con la piel y ojos. En tal caso, lavar la piel y los ojos con abundante agua y consultar a un médico.
SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores.
CONTIENE
R: 2 x 60 ml.
BEIS27-E 07/06/16
Información adicional
| Peso | 0,19 kg |
|---|---|
| Marca | Spinreact |
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