Vagitest, 10 Unidades

Descripción

CONTENIDO

10 sistemas de cultivo listos para el uso (dip-slide) y 10 pastillas para la generación de CO₂.

CONFIGURACIÓN

• Chocolate Agar (marrón).
• Rogosa Agar (ámbar).
• Thayer Martin Agar (marrón).

PRINCIPIO DEL MÉTODO

VAGITEST inoculado con el material clínico (secreción vaginal, secreción uretral u otro), consiente la búsqueda de hemófilos, lactobacilos, Garnerella vaginalis y neisserias patógenas.

Chocolate Agar es un medio enriquecido con sangre defibrinada, cocido, de caballo, y VITALEX growth SUPPLEMENT, mezcla que contiene vitaminas cofactores, aminoácidos y carbohidratos, necesarios para el aislamiento de hemófilos patógenos, de Gardnerella vaginalis, de neisserias patógenas y de otros microorganismos exigentes.

El medio Thayer Martin Agar, mantiene las características de medio rico del Chocolate Agar, pero el suplemento VCAT hace que se vuelva medio selectivo para el aislamiento de las neisserias patógenas de muestras clínicas. El suplemento VCAT es una mezcla de antibióticos: Vancomicina y Colistina que inhiben el crecimiento de los contaminantes Grampositivos y Gramnegativos, el antimicótico Anfotericina impide el crecimiento de hongos mientras que el Trimetoprim bloquea el crecimiento y la enjambrazón de los proteos.

Rogosa Agar es un medio selectivo para el aislamiento de lactobacilos de procedencia oral, vaginal y fecal. La selectividad es dada por un bajo valor de pH y por la alta concentración de acetatos que obstaculizan el crecimiento de otras bacterias, favoreciendo así el desarrollo de los lactobacilos.

FORMULACIÓN TÍPICA DE LOS MEDIOS EMPLEADOS EN VAGITEST (GRAMOS/LITRO)

CHOCOLATE AGAR

Peptona 15.0
Almidón 1.0
Potasio Fosfato Bibásico 4.0
Potasio Fosfato Monobásico 1.0
Sodio Cloruro 5.0
Sangre Defibrinado de Caballo 50.0 ml
Vitalex Growth Supplement 10.0 ml
Agar 17.0
pH 7.2 ± 0.2

ROGOSA AGAR

Triptosa 10.0
Extracto de Levadura 5.0
Glucosa 10.0
Arabinosa 5.0
Sacarosa 5.0
Sodio Acetato 15.0
Amonio Citrato 2.0
Potasio Fosfato Monobásico 6.0
Magnesio Sulfato 0.57
Manganeso Sulfato 0.12
Hierro Sulfato 0.03
Agar 15.0
Tween 80 1.0 ml
pH 5.4 ± 0.2

THAYER MARTIN AGAR

Peptona 15.0
Almidón 1.0
Potasio Fosfato Bibásico 4.0
Potasio Fosfato Monobásico 1.0
Sodio Cloruro 5.0
Sangre Defibrinado de Caballo 50.0 ml
Vitalex Growth Supplement 10.0 ml
Vancomicina 0.002
Colistina 0.0075
Anfotericina 0.001
Trimetoprim 0.003
Agar 15.0
pH 7.2 ± 0.2

RECOLECCIÓN Y CONSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS

Obtener la secreción vaginal con dos tampones en fibra sintética, uno para efectuar la coloración de Gram, el otro para el aislamiento microbiano. Para la toma y la conservación de las muestras para la búsqueda del gonococo, se aconseja el medio de transporte AMIES. Las muestras para la búsqueda de los meningococos no se tienen que conservar, sino enviar directamente al laboratorio.

PROCEDIMIENTO DEL TEST

1. Sacar un dip-slide del frigorífico y dejarlo por unos 5 minutos a temperatura ambiente.
2. Identificar la muestra con etiqueta adhesiva o escribiendo los datos directamente en el contenedor del dip-slide.
3. Desenroscar y extraer el slide del contenedor cilíndrico sin tocar las superficies de los medio de cultivo.
4. Teniendo el slide por el tapón, sembrar directamente las superficies de los medios de cultivo con el material clínico (secreción vaginal, secreción uretral u otro) obtenido con un idóneo tampón de recolección.
5. Introducir en el vaso del slide una pastilla de CO₂, mojada con una gota de agua estéril.
6. Volver a introducir el slide en el contenedor y volver a cerrar enroscando.
7. Incubar en un termostato regulado a 36 ± 1°C por 24-48 horas.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

Después de la incubación la presencia de bacterias es evidenciada por la aparición de colonias en las superficies de los medios de cultivo. Los medios de cultivo se emplean para estimar la calidad y la cantidad de los diferentes géneros microbianos que sostienen la infección o que constituyen la flora normal de la vagina como los lactobacilos.

Los hemófilos crecen en Chocolate Agar con colonias grisáceas, semimates.

El gonococo crece en Chocolate Agar y en Thayer Martin Agar con colonias de diámetro 0.5-1 mm de color blanco o grises, mates y elevadas. Colonias presuntas de gonococo han de identificarse mediante coloración de Gram, test de la oxidasis y fermentación de los azúcares.

Las colonias de los meningococos son más grandes que las de los gonococos, de forma redonda y convexa.

Gardenerella vaginalis crece en Chocolate Agar con colonias grisáceas semimates.

Los lactobacilos crecen en Rogosa Agar con colonias blanco-gris con márgenes regulares, pueden ser tanto aplastadas como elevadas, lisas o arrugados. No todos los lactobacilos crecen en este medio.

CONTROL CALIDAD

Para el control calidad del VAGITEST, los dip-slide son inoculados con las cepas microbianas indicadas en la siguiente tabla.

• Dimensión de la inoculación para productividad: 10-100 UFC/ml.
• Dimensión de la inoculación para selectividad: 104-105 UFC/ml.
• Dimensión de la inoculación para especificidad: ≤ 104 UFC/ml.
• Condiciones de incubación: 24-48 h a 36±1°C, en atmósfera enriquecida con CO₂ (pastillas presentes en el estuche).

Los resultados se interpretan como se describe en la siguiente tabla. Además se controla el aspecto de los medios.

Cepas microbianas utilizados y resultados esperados en el control calidad: