Tricrónomica de Masson kit 5×250 ml

Descripción

PRINCIPIO

Las técnicas tricrómicas permiten la tinción diferencial de colágeno, fibras musculares, fibrina y eritrocitos. Para ello se utilizan tres colorantes distintos que tiñen selectivamente las distintas estructuras celulares, núcleo, citoplasma y fibras de colágeno. Primero se tiñen las muestras con un colorante ácido como el escarlata de Biebrich. Todos los elementos acidófilos del tejido (citoplasma, músculo y colágeno) se unirán al colorante ácido. A continuación las muestras se tratan con ácido fosfotúngstico y/o fosfomolíbdico. Como el citoplasma es mucho menos permeable que el colágeno, los ácidos fosfotúngstico y fosfomolíbdicos permiten que el escarlata de Biebrich difunda del colágeno pero no del citoplasma. Los ácidos fosfotúngsticos y fosfomolíbdicos tienen numerosos grupos ácidos que probablemente actúen como medio de unión entre el colágeno decolorado y el azul de anilina, que es el colorante del colágeno. Probablemente, el pH de la solución fosfotúngstico/fosfomolíbdico también aumente la coloración y ayude al colágeno en la difusión de los colorantes.

Las tinciones tricrómicas permiten diferenciar entre colágeno y musculo liso en tumores e identificar incrementos en tejidos colagenosos en enfermedades como cirrosis hepática.

UTILIDAD DIAGNÓSTICA

Para la detección de fi bras de colágeno y tejido conjuntivo en general, en muestras de tejidos.

COMPOSICIÓN

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Los reactivos almacenados a 15-30ºC y protegidos de la luz, son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los envases deben mantenerse siempre bien cerrados.

Con el tiempo, puede aparecer un ligero precipitado en algún reactivo, que no afecta a la funcionalidad del producto.

MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO

Material de uso general de laboratorio de anatomía patológica.
Etanol, de diferentes concentraciones.
Xileno o Sustituto de Xileno.
Medio de montaje.
Microscopio.

PRECAUCIONES

Los productos son para uso profesional. Todos los reactivos deben manipularse con precaución por personal técnico formado. Se aconseja consultar antes de su uso la ficha de datos de seguridad.

La eliminación de los residuos debe hacerse según la normativa local vigente.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomienda seguir las prácticas de control de calidad marcadas por el CLSI (antes NCCLS). La metódica de tinción indicada es la utilizada de rutina en nuestros laboratorios.

MUESTRA

Muestras histológicas.

Manipular las muestras con precaución por su capacidad potencialmente infecciosa.

PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO

Mezclar a partes iguales, justo antes de su utilización, el reactivo A (Hematoxilina de Weigert A) y el reactivo B (Hematoxilina de Weigert B).

PROCEDIMIENTO

1. Rehidratar la muestra mediante lavados con alcohol absoluto, alcohol 95º y alcohol 70º.
2. Lavar con agua destilada.
3. Teñir durante 10 minutos con la disolución de trabajo de Hematoxilina.
4. Lavar con agua corriente y después con agua destilada.
5. Teñir durante 10–15 minutos con el Reactivo C, Fucsina ácida.
6. Lavar con agua destilada.
7. Diferenciar con Reactivo D,ácido fosfomolíbdico, durante 10–15 minutos, o hasta que el colágeno haya perdido el color.
8. Sin lavar, teñir durante 5–10 minutos las muestras con Reactivo E, azul de metilo.
9. Lavar con agua destilada.
10. Diferenciar con Acido acético al 1% durante 2–5 minutos.
11. Lavar con agua destilada.
12. Deshidratar rápidamente con alcoholes (95% y absoluto); aclarar con xileno y montar la preparación.
13. Examinar al microscopio.

RESULTADOS

Colágeno: Azul.
Núcleos: Negro.
Citoplasma, músculo y queratina: Rosado-rojo.

NOTAS

Cada usuario puede aplicar las diversas variantes de este procedimiento, tanto manual como automático, que se ajuste a su metódica estándar.

Aunque cualquier fijador es válido, algunos autores aconsejan la utilización del fijador de Bouin para la obtención de resultados óptimos. Si el tejido no se ha fijado con Bouin es recomendable sumergir las muestras en solución de Bouin, el cual actúa como mordiente, durante 24 h a temperatura ambiente o 1 h a 56-60 ºC.

El paso por los alcoholes debe durar sólo unos pocos segundos, comprobando siempre que las partes teñidas con fucsina-escarlata vayan virando adecuadamente a un color mas rosado y claro, pero no demasiado tiempo ya que  decoloraría demasiado las partes teñidas con el reactivo E. Para un buen contraste es imprescindible realizar bien este paso.

CONTIENE

5 x 250 ml

PRO4-9_TTRIMA_4