Thayer Martin Agar, 20 Placas

Descripción

FÓRMULA TEÓRICA

• Peptona caseína 15 g/l.
• Peptona soja 5 g/l.
• Extracto de levadura 5 g/l.
• Cloruro sódico 5 g/l.
• Agar bacteriológico 15 g/l.
• Glucosa 2 g/l.
• Sangre de cordero 5,3%.
• Vancomicina 0.002 g/l.
• Colistina 0.0075 g/l.
• Amphotericin B 0.002 g/l.
• Trimethoprim 0.003 g/l.
• pH: 7,2 ±0,2.

DESCRIPCIÓN Y USOS

De las fórmulas iniciales hasta la actualidad se ha variado la composición de los medios y la preparación de los enriquecimientos en los medios con sangre chocolateada para mejorar el aislamiento de Gonococo. Los medios de base más utilizados en la actualidad son medios ricos con peptonas de caseína y Extracto de carne, almidón de maíz para neutralizar componentes tóxicos del agar y tamponados. Los enriquecimientos, en la actualidad, no sólo incluyen los factores V y X sino otros como vitamina B12, PAB, aminoácidos, hierro y glucosa que permitirían no sólo el crecimiento de los Haemophilus sino que facilitan el desarrollo de neisserias exigentes como el gonococo y el meningococo.

La suplementación antibiótica del medio de Thayer y Martin asegura la casi total supresión de la flora saprofita que se puede encontrar en el tipo de muestras colonizables por gonococo. Se asegura, de todos modos, con la disminución de Vancomicina respecto otros autores , la recuperación de cualquier cepa de gonococo. La substitución de Nistatina por Anfotericina B en este medio resulta en una mayor supresión fúngica. La inhibición de neisserias no patógenas, no distinguibles por tinción, aumenta el rendimiento del cultivo, facilitando su lectura y interpretación.

UTILIZACIÓN

Conviene dejar que las placas alcancen la temperatura ambiente y que ofrezcan una superficie húmeda pero no mojada para poder efectuar una siembra por agotamiento correcta.

Las placas se han de incubar a 35º en atmósfera aerobia enriquecida con CO₂, conseguidas en estufas adecuadas, con sobres generadores de CO₂ o mediante el método de la vela. La lectura de las placas debe hacerse a las 24-72 h; las colonias sospechosas de pertenecer a los géneros Neisseria deben resembrarse para su identificación y antibiograma lo más rápidamente posible al observar su desarrollo, que en general se produce a las 48 h. El gonococo es termosensible, por lo que se recomienda efectuar resiembras para obtener mayor cantidad viable de microorganismo.

CONSERVACIÓN

Las placas han de conservarse a temperaturas entre 4-15ºC.

La caducidad de los medios suplementados con sangre desfibrinada estéril de cordero es de un máximo de 3 meses a partir de la fecha de fabricación.

La fecha de caducidad y el número de lote vienen indicados en la base de cada placa individualmente.

CONTROL DE CALIDAD

Respuesta típica después de una incubación de 48 horas a 37 ±2ºC en atmósfera del 5 % de CO₂