Oxidasa Líquida 5 ml

Descripción

FÓRMULA TEÓRICA

N,N,N,N,-Tetramethyl-p-Phenylenediamina 10 gr.
Ácido ascorbico 1 gr.
Agua destilada estéril 1000 mL.

DESCRIPCIÓN Y USOS

Este reactivo permite la detección en los microorganismos del enzima citocromo-oxidasa en base a su posterior identificación bioquímica. El enzima citocromo-oxidasa, muy extendido en la naturaleza, es un enzima del grupo porfirínico, con grupo Hemo. Actúa para oxidar el citocromoC reducido para inactivarlo, aunque éste pueda reactivarse transfiriendo los electrones a oxígeno molecular. El sistema compuesto por el oxígeno molecular y el citocromoC y el citocromoC-Oxidasa interviene pues en múltiples reacciones de oxidación-reducción celulares que tienen lugar durante fosforilaciones oxidativas y vías metabólicas bioquímicas. El funcionamiento del reactivo se basa en la reducción del anillo fenólico en un compuesto coloreado púrpura.

UTILIZACIÓN

La utilización del reactivo es simple y se obtiene una fácil y rápida lectura de resultados. Extender sobre un fragmento de papel de filtro impregnado con el reactivo, preferiblemente con asa de platino que con una asa de cromo, un fragmento de la colonia a estudiar, procurando resembrar previamente o disponer de más inoculo para trabajar con el microorganismo. La aparición inmediata o en pocos segundos de una coloración púrpura, más o menos intensa, revelará la presencia del enzima citocromo oxidasa. No deben emplearse microorganismos aislados en medios que produzcan pigmentación intensa de las colonias como sería el caso del EMB, o medios con indicadores o inhibidores. Debe procurarse no arrastrar restos de medio donde se hayan aislado los microorganismos, sobre todo si el medio contiene sangre desfibrinada de carnero, para evitar falsos positivos. Del mismo modo, no se recomienda la adición de reactivo directamente al medio de cultivo para evitar falsos positivos, aunque existan modificaciones de la técnica que usen esta modificación.

ALMACENAMIENTO

El reactivo recién preparado debe conservase preferiblemente en congelación al abrigo de la luz. Deben descongelarse únicamente aquellos viales con reactivo que vayan a usarse próximamente y mantenerlos en refrigeración entre 4 – 15 ºC. Estos viales con reactivo de Oxidasa deben protegerse de la luz para evitar fotooxidaciones y del aire para evitar las oxidaciones producidas por el oxígeno. Se recomienda no utilizar aquellos viales de reactivo que presenten virajes de color del mismo

CONTROL DE CALIDAD

Es recomendable llevar a cabo un Control de Funcionamiento de cada nuevo lote de Oxidasa, con microorganismos positivos, negativos y positivos débiles, preferiblemente con microorganismos crecidos en medios neutros sin colorantes ni inhibidores. Respuesta típica después de impregnar un fragmento de papel de filtro con reactivo y hacer una estría con asa de platino con una colonia de cada uno de los siguientes microorganismos: