Descripción
PRINCIPIO
La tinción de May-Grünwald es una tinción perteneciente al grupo Romanowsky. Los colorantes tipo Romanowsky están formados por Azul de Metileno y sus derivados oxidados, colorantes básicos, y el colorante ácido Eosina. Los colorantes básicos se unen a los componentes ácidos de las células, ácidos nucleicos, gránulos en neutrófilos y proteínas ácidas que se tiñen de un color rojo púrpura más o menos intenso, mientras que la eosina se une a la hemoglobina, componentes básicos de las estructuras celulares y los gránulos de los eosinófilos.
El balance entre el Azul de Metileno y sus derivados oxidados y entre estos y la Eosina, proporciona una tonalidad más o menos azul y una mayor o menor intensidad en la coloración, que son característicos de cada tipo de colorante Giemsa, May-Grünwald o Wright. Este colorante puede usarse solo o combinado con el colorante Giemsa.
Su utilización permite la tinción diferencial de las celulas sanguíneas. Algunos autores utilizan el colorante May Grünwald o la combinación May Grünwald – Giemsa para la tinción de parásitos en sangre.
USO PREVISTO
Familia de productos sanitarios para diagnóstico in vitro destinados a la diferenciación morfológica de núcleos y citoplasmas de plaquetas, glóbulos blancos y glóbulos rojos para estudios hematológicos e histológicos.
Son colorantes cualitativos que dan información sobre el estado fisiológico o patológico de la muestra de tejido cuando la tinción obtenida es interpretada por profesional cualificado. Para obtener un diagnóstico, los resultados se han de evaluar en el contexto de los antecedentes médicos, el estado físico y el resto de datos clínicos y de laboratorio obtenidos.
Para uso profesional de laboratorio.
COMPOSICIÓN
Eosina-azul de metileno según May-Grünwald, C.I. 45380 >2,5 g/L
Metanol >99 %
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Los reactivos almacenados a 15-30ºC y protegidos de la luz, son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los envases deben mantenerse siempre bien cerrados.
El paso del tiempo y temperaturas inferiores a 15ºC, pueden provocar la aparición de un ligero precipitado en algún reactivo, que no afecta a la funcionalidad del producto.
Se aconseja atemperar el reactivo a 15-30ºC, agitar y fi ltrar el colorante antes de su uso.
La estabilidad en uso debe ser determinada por cada usuario según su criterio.
MATERIAL NO SUMINISTRADO
Material de uso general de laboratorio.
Láminas para la extensión de la sangre.
Sistema, manual o automático, de tinción.
Agua tamponada.
Tampón Fosfato pH 7,2 (Ref. 996513)
Giemsa (Ref. 998440 o Ref. 990939)
Microscopio.
Las tinciones se pueden usar con un método de tinción manual o con equipos automáticos de tinción (consultar teñidores QCA disponibles en la web). Seguir las instrucciones de uso de los equipos automáticos suministradas por el fabricante.
PRECAUCIONES
Los reactivos se deben manipular con precaución. Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo. La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa local vigente.
Cualquier incidente grave relacionado con el producto deberá comunicarse a QCA y a la autoridad competente del estado en el que esté establecido el usuario.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda seguir las prácticas de control de calidad marcadas por los organismos internacionales y realizar tinciones de forma periódica con preparaciones de control de calidad que contengan muestras procesadas de forma similar a las muestras a evaluar.
MUESTRA
Extensiones de sangre y médula osea secadas al aire. Extensiones procedentes de diversos fluidos o tejidos corporales.
La manipulación de las muestras debe realizarse de acuerdo con los protocolos establecidos en cada laboratorio para la preparación de muestras, siguiendo el estado del arte vigente.
Se recomienda que sean finas y homogéneas para obtener una mejor fijación del colorante sin sobrecoloraciones.
Para obtener buenos resultados se aconseja realizar la tinción durante las dos horas siguientes a la preparación. Las extensiones viejas, pueden teñirse de forma irregular.
La muestra idónea es sangre capilar pero si se usa sangre venosa se aconseja utilizar EDTA como anticoagulante. El uso de la Heparina está desaconsejado.
Manipular las muestras con precaución por su capacidad potencialmente infecciosa.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
El colorante está listo para su uso, para tinción manual y para su uso en el QCA STAINER.
PROCEDIMIENTO
El reactivo se usa junto el colorante Giemsa en la tinción combinada May-Grünwald/Giemsa.
- La extensión, secada al aire y sin fijar, se cubre con un volumen conocido (2 mL. aprox.) del colorante May-Grünwald que se deja actuar durante 3 minutos.
- Después, se vierte el colorante, inclinando el portaobjetos y, sin lavar, se cubre con Giemsa recién diluido (1/10) con agua tamponada (pH 7,0 – 7,2) o Tampón Fosfato pH 7,2 (diluido previamente 1/10) antes de su uso.
- Se deja actuar durante 8-20 minutos según la intensidad de coloración que se desee.
- Seguidamente se lava abundantemente con agua tamponada (pH 7,0 – 7,2) o Tampón Fosfato pH 7,2 diluído y se deja secar al aire.
- Examinar al microscopio.
Para el QCA STAINER, las distintas metódicas se encuentran en el sofware del sistema.
Cada usuario debe validar este procedimiento en su laboratorio para ajustarlo a su metódica estándar, aplicando las diversas variantes de este procedimiento, tanto manual como automático, que le permita optimizar los resultados. Se debe tener en cuenta que la intensidad de la coloración es proporcional al tiempo de tinción.
RESULTADOS
Eritrocitos: Color rosa o rosa – anaranjado.
Plaquetas: Color violeta pálido o púrpura.
Neutrófilos: Núcleo violeta oscuro. Citoplasma rosado con granulaciones rojo violeta.
Eosinófilos: Núcleo violeta. Citoplasma azul con gránulos rojos o rojo anaranjado.
Basófilos: Núcleo azul oscuro o púrpura. Gránulos púrpura casi negros.
Linfocitos: Núcleo púrpura. Citoplasma azul celeste.
Monocitos: Núcleo laxo violeta. Citoplasma azul celeste.
NOTAS
El resultado de la tinción es orientativo y debe confirmarse con pruebas adicionales adecuadas.
Los resultados de coloración indicados son orientativos ya que la intensidad y la tonalidad del color pueden ser influenciados por diferentes factores como son la fijación, el tiempo de tinción (la intensidad de la coloración es proporcional al tiempo de tinción), el pH de las soluciones usadas (en general se obtienen coloraciones más rojizas al disminuir el pH y coloraciones más azules a pH más básicos).
Para los procesos de lavado se recomienda utilizar Tampón Fosfato diluido a una concentración inferior a 10mM o agua tamponada en lugar de agua corriente. El agua corriente tiene un pH y un contenido en sales variables que, junto con concentraciones elevadas de cloro, pueden alterar los resultados de la tinción y dar lugar a resultados no consistentes.
CONTIENE
1 x 500 ml
PRO4-9_MAYG_5
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