Legionella BCYE Agar sin Cisteina, 20 Placas

Descripción

FÓRMULA TEÓRICA

• Tampón ACES 10 g/l.
• Cetoglutarico 1 g/l.
• Extracto de levadura 10 g/l.
• Carbón activo 3,5 g/l.
• Agar bacteriológico 13 g/l.
• Hidróxido de potasio 2,8 g/l.
• Pirofosfato de hierro 0,25 g/l.
• pH: 6,8 ±0,2.

DESCRIPCIÓN Y USOS

Desde el descubrimiento de Legionella pneumophila, se han diseñado diversos medios para su aislamiento y propagación después de múltiples variaciones. El medio BCYE, según la formulación propuesta por Eldestein, es uno de los más adecuados para el cultivo de las especies del género Legionella spp.

La base del medio está elaborada con extracto de levadura, carbón activo y agar. Esta base, tamponada con ACES y suplementada con pirofosfato férrico, L-cisteína, y Cetoglutarato aporta los elementos necesarios para el crecimiento de Legionella spp. El uso de medio base requiere, por lo tanto, suplementación obligada de estos elementos para lograr crecimiento de Legionella spp. En el medio BCYE las especies de Legionella spp causantes de infección en el hombre crecen bien a las 48-72 horas, aunque la incubación debe mantenerse hasta 10 días antes de descartar los cultivos como negativos. El medio BCYE sin cisteína mantiene la formulación del medio BCYE pero sin el suplemento de L-cisteína requerimiento nutricional imprescindible para el crecimiento de Legionella.

El aspecto blanco grisáceo o azulado de las colonias, aunque ligeramente diferente según las especies de Legionella, es característico y para su identificación presuntiva han de resembrarse en el medio BCYE y en BCYE sin cisteína observándose crecimiento solamente en el primero. La tinción mediante el método de Gram, utilizando fucsina como colorante de contraste, permite reconocer su morfología de bacilo gramnegativo fino y pleomórfico.

La identificación definitiva debe hacerse siguiendo las técnicas estandarizadas en el laboratorio.

UTILIZACIÓN

Antes de la siembra es recomendable que las placas alcancen la temperatura ambiente. La superficie debe estar húmeda pero no mojada.

Las placas para la resiembra y propagación de Legionella spp se utilizan según técnicas convencionales.

Las placas deben incubarse a 36ºC en atmósfera aerobia humidificada con CO₂ al 5%. Mantener la incubación durante 7-10 días antes de descartar las placas. Se deben utilizar en paralelo con placas BCYE para realizar un comparativo de los resultados.

Diversas especies de Legionella spp son potencialmente patógenas para el hombre. Debe evitarse la formación de aerosoles y trabajar preferentemente en cabinas protectoras adecuadas.

CONSERVACIÓN

Las placas han de conservarse a temperaturas entre 4-15ºC, siempre en su caja de embalaje para preservarlas de la luz. La fecha de caducidad está indicada en las placas.

CONTROL DE CALIDAD

Respuesta típica en placas BCYE- Cys después de una incubación de 72 h. a 36±2 ºC en un 5 % de CO₂: