Hematoxilina de Harris 1.000 ml

Descripción

PRINCIPIO

La prueba de Papanicolaou, que debe su nombre al Dr. Georgios Papanicolaou, pionero en citología y cáncer, se realiza para diagnosticar el cáncer cervicouterino y de otros órganos. Permite detectar cambios de las células que pueden ser precursores de cáncer. En ésta técnica, el primer paso es la tinción de núcleos, con hematoxilinas. El segundo paso es la tinción de citoplasmas con una solución anaranjada, que tiñe las células maduras y queratinizadas con diferente intensidad. En el tercer paso de tinción se usa la llamada solución polícroma, que es una mezcla de eosina, verde luz SF y pardo de Bismarck. Con la solución polícroma se muestra la diferenciación del epitelio escamoso simple. La tinción de Hematoxilina -Eosina es la más utilizada en histología.

Los colorantes de Hematoxilina están formados básicamente por lacas metálicas de hematoxilina oxidada con iones divalentes o trivalentes. El mecanismo de tinción se realiza mediante uniones covalentes del complejo metal-hematoxilina con radicales aniónicos del tejido. En el caso del material nuclear en la reacción intervendrían los grupos aniónicos del ácido fosfórico del ADN. La selectividad de la tinción se incrementa con el medio ácido del colorante, ya que dificulta la coloración de elementos de carácter anfótero, como son los aminoácidos de las proteínas. Los núcleos aparecen azul a violeta oscuro.

Con la hematoxilina se puede realizar la tinción progresiva y la regresiva. En la tinción regresiva las estructuras del núcleo se presentan más diferenciadas y se pueden ver mejor.

USO PREVISTO

Familia de productos sanitarios para diagnóstico in vitro destinado a la tinción de núcleos para histocitología.

Son colorantes cualitativos que dan información sobre el estado fisiológico o patológico de la muestra de tejido cuando la tinción obtenida es interpretada por profesional cualificado. Para obtener un diagnóstico, los resultados se han de evaluar en el contexto de los antecedentes médicos, el estado físico y el resto de datos clínicos y de laboratorio obtenidos.

Para uso profesional de laboratorio.

COMPOSICIÓN

Hematoxilina, CI nº 75 290 0,5 %
Sulfato de Aluminio 6 %
Etilenglicol 15 %

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Los reactivos almacenados a 15-30ºC y protegidos de la luz, son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los envases deben mantenerse siempre bien cerrados.

El paso del tiempo y temperaturas inferiores a 15ºC, pueden provocar la aparición de un ligero precipitado en algún reactivo, que no afecta a la funcionalidad del producto.
Se aconseja atemperar el reactivo a 15-30ºC, agitar y fi ltrar el colorante antes de su uso.

La estabilidad en uso debe ser determinada por cada usuario según su criterio.

MATERIAL NO SUMINISTRADO

Material de uso general de laboratorio de anatomía patológica.
Colorante de Hematoxilina (consultar referencias QCA disponibles en la web).
Etanol, de diferentes concentraciones (consultar referencias QCA disponibles en la web).
Xileno o Sustituto de Xileno (consultar referencias QCA disponibles en la web).
Medio de montaje.
Microscopio.

Las tinciones se pueden usar con un método de tinción manual o con equipos automáticos de tinción (consultar teñidores QCA disponibles en la web). Seguir las instrucciones de uso de los equipos automáticos suministradas por el fabricante.

PRECAUCIONES

Los reactivos se deben manipular con precaución. Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo. La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa local vigente.

Cualquier incidente grave relacionado con el producto deberá comunicarse a QCA y a la autoridad competente del estado en el que esté establecido el usuario.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomienda seguir las prácticas de control de calidad marcadas por los organismos internacionales y realizar tinciones de forma periódica con preparaciones de control de calidad que contengan muestras procesadas de forma similar a las muestras a evaluar.

MUESTRA

Muestras citológicas e histológicas de distintos orígenes: ginecológicas, esputos, líquidos de biopsias.

La manipulación de las muestras debe realizarse de acuerdo con los protocolos establecidos en cada laboratorio para la preparación de muestras, siguiendo el estado del arte vigente.

Manipular las muestras con precaución por su capacidad potencialmente infecciosa.

PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO

El colorante está listo para su uso, para tinción manual y para su uso en el QCA STAINER.

PROCEDIMIENTO

TINCIÓN DE PAPANICOLAOU MANUAL

1. Las extensiones que se hayan fijado con “spray” deben sumergirse en agua durante 5-10 minutos para que la carboximetilcelulosa (CMC) que contiene se disuelva completamente.
2. Inmersión durante 1 minuto en Hematoxilina de Harris.
3. Lavado con agua 15 segundos.
4. Lavado con etanol-HCl (0,25%) 10 segundos.
5. Lavado con agua 15 segundos.
6. Lavado con agua amoniacal (0,05% en NH3) 5 segundos.
7. Lavado con agua 15 segundos.
8. Inmersión en etanol de 96º 10 segundos (dos veces, distinto contenedor).
9. Inmersión en el colorante OG-6, 3 minutos.
10. Lavado en etanol de 96º 15 segundos (dos veces, distinto contenedor).
11. Inmersión en el colorante EA 50 ó EA 36 ó EA 65, 3 minutos.
12. Lavado en etanol de 96º 15 segundos (dos veces, distinto contenedor).
13. Inmersión en etanol absoluto 15 segundos (dos veces, distinto contenedor).
14. Inmersión en etanol / xilol (50%) 15 segundos.
15. Inmersión en xilol 15 segundos.
16. Inmersión en xilol durante 2 minutos.
17. Montar la preparación.

TINCIÓN HEMATOXILINA-EOSINA

1. Desparafinar la preparación.
2. Después de la última inmersión en etanol lavar con agua destilada durante 1 minuto.
3. Inmersión durante 8 minutos en Hematoxilina.
4. Lavado con agua 1 minuto.
5. Lavado con etanol-HCl (0,5%) 13 segundos.
6. Lavado con agua 15 segundos.
7. Lavado con agua amoniacal (0,05% en NH3) 30 segundos.
8. Lavado con agua 1 minuto.
9. Inmersión durante 30 segundos en Eosina al 1%.
10. Inmersión en etanol de 96º 6 segundos (dos veces, distinto contenedor).
11. Inmersión en etanol absoluto 6 segundos (tres veces, distinto contenedor).
12. Inmersión en xilol/eucaliptol 6 segundos (dos veces, distinto contenedor).
13. Montar la preparación.

TINCIÓN HEMATOXILINA MAYER-EOSINA

1. Desparafinar la preparación.
2. Después de la última inmersión en etanol lavar con agua destilada durante 5 minutos.
3. Inmersión durante 10 minutos en Hematoxilina de Mayer.
4. Lavado con agua 5 minutos.
5. Inmersión durante 2 minutos en Eosina alcohólica al 1%.
6. Inmersión en etanol de 96º 10 -15 segundos (dos veces, distinto contenedor).
7. Inmersión en etanol absoluto 10-15 segundos (dos veces, distinto contenedor).
8. Inmersión en xilol (tres veces, distinto contenedor).
9. Montar la preparación.

Para el QCA STAINER, las distintas metódicas se encuentran en el sofware del sistema.

Cada usuario debe validar este procedimiento en su laboratorio para ajustarlo a su metódica estándar, aplicando las diversas variantes de este procedimiento, tanto manual como automático, que le permita optimizar los resultados. Se debe tener en cuenta que la intensidad de la coloración es proporcional al tiempo de tinción.

RESULTADOS

Núcleos: Azul violeta.
Citoplasma acidófilo: Rojizo.
Citoplasma basófilo: Azul.
Citoplasma queratinizado: Anaranjado.

NOTAS

El resultado de la tinción es orientativo y debe confirmarse con pruebas adicionales adecuadas.

Los resultados de coloración indicados son orientativos ya que la intensidad y la tonalidad del color pueden ser influenciados por diferentes factores como son la fijación o el tiempo de tinción (la intensidad de la coloración es proporcional al tiempo de tinción).

CONTIENE

1 x 1.000 mL

PRO4-9_HEMATOX_6