Descripción
FÓRMULA TEÓRICA
- Hektoen agar 76 g/L.
- pH: 7,6 ±0,2.
DESCRIPCIÓN Y USOS
El Agar Hektoen fue formulado para aumentar la tasa de aislamiento de Salmonella y Shigella respecto a medios más selectivos.
Las sales biliares que contiene el medio inhiben a la flora Gram positiva y a algunas bacterias Gram negativas. La diferenciación de las cepas se logra reduciendo los indicadores coloreados por su toxicidad y con la fermentación de tres azúcares. Lactosa, Sacarosa y Salicina; además, el alto contenido de Lactosa evita falsas interpretaciones con los fermentadores lentos.
Las bacterias productoras de gas sulfhídrico, son detectadas por la aparición de centros negros en sus colonias. Este centro negro se produce porque con el tiosulfato sódico del medio, el sulfhídrico reduce el citrato férrico amoniacal dando lugar al precipitado oscuro de sulfito férrico.
El sistema de color indicador del medio compuesto de Azul de Bromotimol y Fucsina ácida, evidencia colonias amarillentas para las colonias Lactosa-fermentadoras y verde-azuladas para las cepas Lactosa-negativas.
UTILIZACIÓN E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Antes de la siembra es recomendable que las placas alcancen la temperatura ambiente. La superficie del medio debe aparecer húmeda sin exceso de agua. Inocular y estriar hasta agotamiento, la muestra directa o un caldo de enriquecimiento previamente inoculado. Incubar a 37 ºC durante 24 horas.
Las colonias de microorganismos que fermenten alguno de los azúcares aparecerán con un color amarillento-asalmonado. Aquellos microorganismos que no fermenten ninguno de los azúcares, formaran colonias verdoso-azuladas.
ALMACENAMIENTO
Las placas con este medio deben conservarse en refrigeración a 4-15 ºC, preferiblemente en la oscuridad. La caducidad y el número de lote vienen indicados en la base de cada placa individualmente.
La precipitación-cristalización de las sales biliares propiciada por la refrigeración no resta cualidades al medio si no llega a ser excesiva.
CONTROL DE CALIDAD
Respuesta típica después de una incubación de 24 horas a 37±2 ºC:
Shigella flexneri |
ATCC 12022
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Excelente. Colonia verde
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Salmonella typhimurium
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ATCC 14028
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Excelente. Colonia verde con centro negro.
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Escherichia coli
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ATCC 25922
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Inhibición parcial. Colonia amarillo-anaranjada.
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Enterococcus faecalis
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ATCC 29212
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Inhibición.
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