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Fosfatasa alcalina DGKC 10×50 ml

83,08 €

Determinación cuantitativa de fosfatasa alcalina (FAL).
IVD.
Conservar a 2-8ºC.

Disponible para reserva

Descripción

PRINCIPIO DEL MÉTODO

La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza la hidrólisis del p-nitrofenilfosfato (pNPP) a pH 10,4 liberando p-nitrofenol y fosfato, según la siguiente reacción:

p-Nitrofenilfosfato + H2O __FAL__→ p-Nitrofenol + Fosfato

La velocidad de formación del p-Nitrofenol, determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de fosfatasa alcalina en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

Las fosfatasas alcalinas son enzimas que se encuentran presentes en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente alta en huesos, hígado, placenta, intestinos y riñón.

Tanto el aumento como la disminución de los niveles en plasma, tienen significado clínico. Causas más probables de aumento del nivel de FAL: Enfermedad ósea de Paget, obstrucciones hepáticas, hepatitis, hepatotoxicidad por medicamentos y osteomalacia.

Causas más probables de disminución del nivel de FAL: Cretinismo y déficit de vitamina C.

El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

R1
Tampón
Dietanolamina (DEA) pH 10,4 1 mmol/L
Cloruro de magnesio 0,5 mmol/L
R2
Substrato
p-Nitrofenilfosfato (pNPP) 10 mmol/L

PREPARACIÓN

Reactivo de trabajo (RT):
Disolver (→) el contenido de un vial de R2 Substrato en 50 mL de R1.

Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 5 días a temperatura ambiente (15-25ºC).

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.

No usar las tabletas si aparecen fragmentadas.

No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

Indicadores de deterioro de los reactivos:

  • Presencia de partículas y turbidez.
  • Absorbancias del Blanco a 405 nm ≥ 1,30.

MATERIAL ADICIONAL NO SUMINISTRADO

  • Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405 nm.
  • Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC).
  • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

Suero o plasma heparinizado.

Suero libre de hemólisis, separado de los hematíes lo antes posible.

Estabilidad: 3 días a 2-8ºC.

PROCEDIMIENTO

Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: 405 nm.
Cubeta: 1 cm paso de luz.
Temperatura constante: 25ºC / 30ºC / 37ºC.

Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.

Pipetear en una cubeta:

RT (mL)
1,2
Muestra ( µL)
20

Mezclar, incubar 1 minuto.

Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.

Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto ( ΔA/min).

CÁLCULOS

ΔA/min x 3300 = U/L de FAL

Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).

Factores de conversión de temperaturas
Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:

Temperatura de medición
Factor para convertir a
25ºC
30ºC
37ºC
25ºC
1,00
1,22
1,64
30ºC
0,82
1,00
1,33
37ºC
0,61
0,75
1,00

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210). Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

 
25ºC
30ºC
37ºC
Niños (1-14 años)
< 400 U/L
< 480 U/L
< 645 U/L
Adultos
60 -170 U/L
73 – 207 U/L
98 – 279 U/L

Factores que pueden afectar los valores de referencia son: ejercicio, periodos de crecimiento en niños y embarazo.

Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO

Rango de medida: Desde el límite de detección 0 U/L hasta el límite de linealidad 1200 U/L.

Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/10 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.

Precisión:

 
Intraserie (n= 20)
Interserie (n= 20)
Media (U/L)
167
424
166
430
SD
0,94
1,93
3,44
5,92
CV (%)
0,56
0,46
2,07
1,38

Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,0003 ΔA/min.

Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).

Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Coeficiente de correlación (r)2: 0,999.
Ecuación de la recta de regresión: y=0,999x – 0,918.

Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

El fluoruro, oxalato, citrato y EDTA inhiben la actividad de la fosfatasa alcalina, por lo que no deben ser utilizados como anticoagulantes.

La hemólisis interfiere debido a la elevada concentración de fosfatasa alcalina en los hematíes.

Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la fosfatasa alcalina.

PRESENTACIÓN

R1: 10 x 50 mL.
R2: 10 → 50 mL.

BEIS07-E 23/02/16

Información adicional

Peso 0,85 kg

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