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Fosfatasa ácida 10×15 ml

91,23 €

Determinación cuantitativa de fosfatasa ácida (FAC).
IVD.
Conservar a 2-8ºC.

Disponible para reserva

Descripción

PRINCIPIO DEL MÉTODO

Método Hillmann: La fosfatasa ácida a pH 5,0 hidroliza el α-naftilfosfato o fosfato inorgánico a α-naftol.

α-naftilfosfato + H2O __FAC__→α-naftol + fosfato

α-naftol + Fast Red TR _______→ Azo Dye

El α-naftol se hace reaccionar con un cromógeno diazotado formando un compuesto coloreado con pico de absorción a 405 nm.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La fosfatasa ácida es una enzima que se encuentra presente en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente altas en próstata, estómago, hígado, músculo, bazo, eritrocitos y plaquetas.

Niveles elevados de fosfatasas ácidas se encuentra en alteraciones prostáticas como hipertrofia, prostatitis o carcinoma, en enfermedades hematológicas, óseas (enfermedad de Paget) o hepáticas.

Niveles bajos de fosfatasa ácida no tiene significado clínico. El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

R1
Tampón
Citrato sódico pH 5,2 50 mmol/L
R2
Sustrato
α-Naftil fosfato 10 mmol/L
Fast Red TR 6 mmol/L
R3
Tartrato
Tartrato sódico 2 mmol/L
Hidróxido de sodio 1800 mmol/L

PRECAUCIONES

R3: H314-Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares graves. Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto.

PREPARACIÓN

  • Reactivo de trabajo (RT):
    Disolver ( → ) un comprimido de R2 Sustrato en en 15 mL de R1.
    Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.
    Estabilidad: 2 días a 2-8ºC o 6 horas a temperatura ambiente.
  • R3: Listo para su uso.

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.

No usar los comprimidos si aparecen fragmentados. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

Indicadores de deterioro de los reactivos:

  • Presencia de partículas y turbidez.
  • Absorbancias del Blanco (A) a 405 nm ≥ 0,44.

MATERIAL ADICIONAL NO SUMINISTRADO

  • Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405 nm.
  • Baño termostatable a 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC).
  • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

Suero. Usar suero libre de partículas y hemólisis, separado de los hematies lo antes posible. No usar plasma.

La fosfatasa ácida en suero es muy inestable, estabilizar mediante la adición de 50 µL de ácido acético por cada mL de muestra. Estabilidad: 7 días a 2-8ºC.

PROCEDIMIENTO

Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: 405 nm.
Cubeta: 1 cm paso de luz.
Temperatura constante: 30ºC / 37ºC.

Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.

Pipetear en una cubeta:

 
FAC Total (T)
FAC No Prostática (No P)
RT (mL)
1,0
1,0
R 3 (µL)
—
10
Muestra (µL)
100
100

Mezclar, incubar 5 minutos.

Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.

Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto (ΔA/min).

CÁLCULOS

ΔA/min x 750 = U/L de FAC (T)

750 x (ΔE/min FAC (T) – ΔE/min FAC No inhibida por Tartrato) = U/L de FAC Prostática.

Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 µmol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).

Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.

Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

Fosf. ácida total
30ºC
37ºC
Hombres
< 4,3 U/L
< 5,4 U/L
Mujeres
< 3,1 U/L
< 4,2 U/L
 
 
 
Fosf. ácida Prostática
< 1,5 U/L
< 1,7 U/L

Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO (FAC TOTAL)

Rango de medida: Desde el límite de detección 0 U/L hasta el límite de linealidad 150 U/L.

Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.

Precisión:

 
Intraserie (n= 20)
Interserie (n= 20)
Media (U/L)
26,7
57,5
29,3
63,0
SD
0,15
0,19
1,70
2,48
CV (%)
0,58
0,34
5,82
3,94

Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,00156 ΔA/min.

Exactitud: Los reactivos SPINREACT no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales. Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:

Coeficiente de correlación (r)2: 0,970510.
Ecuación de la recta de regresión: y= 0,82963x + 1,06196.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

La hemólisis interfiere debido a la elevada concentración de fosfatasa ácida presente en los hematies.

Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la fosfatasa ácida.

PRESENTACIÓN

R1: 1 x 150 mL.
R2: 10 → 15 mL.
R3: 1 x 2 mL.

BEIS06-E 20/05/16

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