Descripción
PRINCIPIO DEL MÉTODO
El Fibrinógeno, en presencia de un exceso de trombina, se transforma en Fibrina. El tiempo de formación del coágulo es inversamente proporcional a la concentración de Fibrinógeno presente en la muestra de plasma. La determinación de fibrinógeno por el tiempo de coagulación de trombina, está basada en el método descrito por Clauss . En presencia de altas concentraciones de trombina, el tiempo necesario para la formación del coágulo en el plasma diluido es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno.
SIGNIFICADO CLÍNICO
El Fibrinógeno (Factor I), proteína sintetizada en el hígado, es un componente de la sangre utilizado para formar el coágulo. Su determinación nos ayuda a evaluar las alteraciones en los mecanismos de coagulación. La concentración de fibrinógeno se incrementa en inflamaciones agudas y embarazo; por el contrario se observan valores bajos en terapias trombolíticas, enfermedades hepáticas, disfibrinogenia congénita, DIC (Coagulación intravascular diseminada) y pancreatitis . El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
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R1 |
Trombina bovina ≈ 100 u NIH/mL
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R2
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Tampón Imidazol, Azida sódica
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R3
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Solución Caolín
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Opcional
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PRECAUCIONES
R2: H290- Puede ser corrosivo para los metales. H302-Nocivo en caso de ingestión. H360-Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. H412-Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos. Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto.
PREPARACIÓN
R1: Reconstituir ( → ) en 2,0 mL de agua destilada. Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Estabilidad: 7 días a 2-8 ºC o 1 mes a -20 ºC, si se congela inmediatamente y se conserva en el frasco original. No volver a congelar.
R2: Agitar antes de usar.
R3: Listo para su uso.
TRAZABILIDAD
El Calibrador de Coagulación es trazable para el Fibrinógeno al estándar de la OMS, 2º Estándar Internacional para Fibrinógeno, plasma (98/612).
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC y se evita su contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
INDICADORES DE DETERIORO DE LOS REACTIVOS:
- Presencia de partículas y turbidez.
- Resultados en el Control de calidad fuera de los rangos establecidos.
- Variaciones de color.
MATERIAL ADICIONAL
- Coagulómetro o cronómetro y baño a 37ºC ± 0,5ºC.
- Equipamiento habitual de laboratorio.
MUESTRAS
Plasma obtenido por punción venosa diluido 1/10 en solución de citrato trisódico 3,8% (105 mmol/L).
Mezclar inmediatamente la sangre con el anticoagulante. Evitar la formación de espuma.
Centrifugar la muestra a 3000 x g 10 min y transferir el plasma.
Usar sólo contenedores de vidrio siliconado o plástico.
Los plasmas turbios, ictéricos, lipémicos o hemolizados pueden dar resultados erróneos.
La muestra es estable 4 horas a temperatura ambiente (15-25ºC) o 28 días si se congela inmediatamente a -20ºC.
NOTAS
- El material de laboratorio usado debe estar libre de restos de detergente.
- Seguir minuciosamente las instrucciones del fabricante del instrumento, los resultados obtenidos deben ser validados por el laboratorio.
PROCEDIMIENTO
El reactivo puede emplearse en técnica manual, mecánica, fotoóptica o con cualquier instrumento apto para detectar la formación del coágulo.
- Preparar una dilución 1/10 de la muestra y los Controles en Tampón Imidazol: 50 ?L muestra + 450 ?L Tampón Imidazol. La muestra diluida debe ser procesada antes de 1 hora.
- Preparar las siguientes diluciones del Calibrador en Tampón Imidazol:
| Dilución del Calibrador |
1/40 |
1/30 |
1/20 |
1/10 |
1/5 |
| Tampón Imidazol (mL) |
3.9 |
2.9
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1.9
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0.9
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0.4
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| Calibrador de coagulación (mL) |
0.1
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0.1
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0.1
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0.1
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0.1
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| Factor |
10/40*
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10/30*
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10/20*
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10/10*
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10/5*
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| Concentración (mg/dL) |
0.25* x c
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0.33* x c
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0.5* x c
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1* x c
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2* x c
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