Descripción
PRINCIPIO
El estudio de la morfología, mobilidad, concentración e integridad de membrana de los espermatozoides es un componente importante en la evaluación de la calidad seminal. La fertilidad disminuye cuando el porcentaje de células anormales aumenta.
Los espermatozoides muertos o en proceso de muerte, poseen sus membranas permeables a los colorantes. Por tal razón se emplea esta propiedad para la determinación de los espermatozoides vivos. Dado que los espermatozoides inmóviles pueden estar vivos, solo una coloración supravital como la de eosina nigrosina puede establecer esa diferencia.
La Eosina penetra a través de la membrana de los espermatozoides muertos tiñéndolos de color rosa, en tanto que los vivos permanecen incoloros. La Nigrosina, por otra parte, dibuja en azul oscuro el perfil de los espermatozoides vivos.
USO PREVISTO
Familia de productos sanitarios para diagnóstico in vitro para la determinación de espermatozoides vivos y su morfología en muestras de esperma.
Son colorantes cualitativos que dan información sobre el estado fisiológico o patológico de la muestra de tejido cuando la tinción obtenida es interpretada por profesional cualificado. Para obtener un diagnóstico, los resultados se han de evaluar en el contexto de los antecedentes médicos, el estado físico y el resto de datos clínicos y de laboratorio obtenidos.
Para uso profesional de laboratorio.
COMPOSICIÓN
Reactivo A.
Solución Eosina 10 mL |
Composición:
Disolución acuosa de Eosina Amarillenta, CI nº 45 380 20 g/L |
Ref. 996520
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Reactivo B.
Solución Nigrosina 10 mL |
Composición:
Disolución acuosa de Nigrosina, CI nº 50 420 20 g/L |
Ref. 996525
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CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Los reactivos almacenados a 15-30ºC y protegidos de la luz, son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los envases deben mantenerse siempre bien cerrados.
El paso del tiempo y temperaturas inferiores a 15ºC, pueden provocar la aparición de un ligero precipitado en algún reactivo, que no afecta a la funcionalidad del producto.
Se aconseja atemperar el reactivo a 15-30ºC, agitar y filtrar el colorante antes de su uso.
La estabilidad en uso debe ser determinada por cada usuario según su criterio
MATERIAL NO SUMINISTRADO
Material de uso general de laboratorio.
Láminas para la extensión del semen.
Sistema calefactor.
Microscopio.
PRECAUCIONES
Los reactivos se deben manipular con precaución. Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo. La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa local vigente.
Cualquier incidencia grave relacionada con el producto deberá ser comunicada a QCA ya la autoridad competente del Estado en el que esté establecido el usuario.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda seguir las prácticas de control de calidad marcadas por los organismos internacionales y realizar tinciones de forma periódica con preparaciones de control de calidad que contengan muestras procesadas de forma similar a las muestras a evaluar.
MUESTRA
Extensiones de semen.
La manipulación de las muestras debe realizarse de acuerdo con los protocolos establecidos en cada laboratorio para la preparación de muestras, siguiendo el estado del arte vigente.
Para obtener buenos resultados se aconseja realizar la tinción con muestras frescas. Las extensiones viejas, pueden teñirse de forma irregular.
Manipular las muestras con precaución por su capacidad potencialmente infecciosa.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
El colorante está listo para su uso.
PROCEDIMIENTO
- Una vez licuado el semen (al menos 30 minutos después de la eyaculación) mezclar dos gotas de esperma con dos gotas de solución de Eosina en un tubo de hemólisis.
- Transcurridos unos 30 segundos, agregar dos gotas de solución de Nigrosina. Agitar suavemente.
- Disponer una gota de la mezcla anterior entre porta y cubre.
- Examinar immediatamente al microscopio a 40X contando el número de espermatozoides muertos respecto a los vivos.
Cada usuario debe validar este procedimiento en su laboratorio para ajustarlo a su metódica estándar, aplicando las diversas variantes de este procedimiento, tanto manual como automático, que le permita optimizar los resultados.
RESULTADOS
Espermatozoides vivos: color blanco.
Espermatozoides muertos o dañados: color rosado.
NOTAS
El resultado de la tinción es orientativo y debe confirmarse con pruebas adicionales adecuadas. Se debe tener en cuenta la edad del paciente a la hora de interpretar los resultados obtenidos.
Los resultados de coloración indicados son orientativos ya que la intensidad y la tonalidad del color pueden ser influenciados por diferentes factores como son la fijación o el tiempo de tinción.
Los frotis deben mantenerse en un lugar seco. La humedad deteriora las pruebas.
Los colorantes deben mantenerse durante su uso alrededor de 30°C (platina térmica o estufa) para evitar el shock térmico y dar resultados erróneos.
CONTIENE
Solución Eosina 1 x 10 mL
Solución Nigrosina 1 x 10 mL
PRO4-9_EOSNIG_4
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