Descripción
DESCRIPCIÓN
EnteroPluri-Test es un sistema de 12 sectores que contienen medios de cultivo especiales que permiten identificar Enterobacteriaceae y otras bacterias gramnegativas, oxidasas negativas. El sistema permite inocular simultáneamente todos los medios presentes en los sectores y ejecutar 15 reacciones bioquímicas.
El microorganismo se identifica evaluando el viraje de color de los distintos medios de cultivo tras 18- 24 horas de incubación a 36 ± 1°C y mediante la codificación numérica que se obtiene con la interpretación de las reacciones bioquímicas.
PRODUCTOS NECESARIOS NO CONTENIDOS
|
Kovac’s Reagent |
Ref. 80271
|
|
EnteroPluri-Test Manual de los códigos
|
Ref. 71709
|
|
Oxidasa bastoncitos de algodón
|
Ref. 88029
|
|
Compresas
|
Ref. 88003
|
|
Discos para pruebas
|
Ref. 88004
|
|
VP test EP
|
Ref. 80281
|
Material variado para laboratorios de microbiología.
CONFIGURACIÓN
|
Sectores |
REACCIÓN BIOQUÍMICA
|
|
Glucosa / Gas
|
Fermentación de la glucosa e producción de gas en anaerobiosis
|
|
Lisina
|
Descarboxilación de la lisina en anerobiosis
|
|
Ornitina
|
Descarboxilación de la ornitina en anerobiosis
|
|
H2S / H2Indol
|
Producción de hidrógeno sulfurado y producción de indol
|
|
Adonitol
|
Fermentación del adonitol
|
|
Lactosa
|
Fermentación de la lactosa
|
|
Arabinosa
|
Fermentación de la arabinosa
|
|
Sorbitol
|
Fermentación del sorbitol
|
|
VP
|
Producción de acetoína (Voges-Proskauer)
|
|
Dulcitol / PA
|
Fermentación del dulcitol y deaminación de la fenilalanina
|
|
Urea
|
Hidrólisis de la urea
|
|
Citrata
|
Utilización del citrato
|
PRINCIPIO DEL MÉTODO
EnteroPluri-Test permite realizar la identificación de las Enterobacteriaceae y de otras bacterias gramnegativas, oxidasas negativas aisladas de muestras clínicas y del medio ambiente. La identificación se basa en pruebas bioquímicas realizadas en medios de cultivo que contienen sustratos específicos. La combinación de las reacciones positivas y negativas permite la formación de un código numérico que, a su vez, permite identificar, con la ayuda del Manual de los códigos, las bacterias en examen.
RECOGIDA DE LAS MUESTRAS
EnteroPluri-Test se utiliza para identificar bacterias gramnegativas, oxidasas negativas aisladas en terrenos de cultivo agarizados selectivos para el aislamiento de las Enterobacteriaceae como: Mac Conkey Agar (MCA), Eosin Methylene Blue Agar (EMBA), Salmonella e Shigella Agar (SSA), Hektoen Enteric Agar(HEA) o en medios no selectivos.
PROCEDIMIENTO DEL TEST
El microorganismo que hay que identificar ha de ser de aislamiento reciente (18-24 horas); bacterias provenientes de cultivos con más de 48 horas pueden dar lugar a resultados no atendibles. Antes de proceder a sembrar el microorganismo en examen, es necesario realizar la coloración de gram y el test de la oxidasa en el mismo. Sólo las bacterias gramnegativas, oxidasas negativas puede sembrarse en EnteroPluri-Test. Para ejecutar correctamente ambos test se remite a los manuales de bacteriología idóneos.
Tome un sistema EnteroPluri-Test del estuche y anote en él: nombre de identificación de la muestra bacteriana que hay que someter a una identificación, fecha de ejecución y otras informaciones idóneas.
Desenrosque ambos capuchones del sistema. Utilizando la punta del hilo de inoculación, colocada sobre el capuchón blanco y sin flamear, tome un colonia bien aislada de un terreno agarizado selectivo y no selectivo, prestando atención a no penetrar en el agar.
Inocule EnteroPluri-Test girando el hilo y extrayéndolo a través de todos los sectores del sistema.
Reintroduzca el hilo con un movimiento giratorio hasta la muesca de rotura; rompa el hilo de inoculación plegándolo en correspondencia con la muesca. La parte del hilo que queda dentro del sistema mantiene el ambiente anaerobio necesario para las reacciones de los compartimientos Glucosa/Gas, Lisina y Ornithina.
Utilice la parte del hilo que ha quedado rota en mano del operador, para agujerear la película de plástico en correspondencia con los orificios de los sectores Adonitol, Lactosa, Arabinosa, Sorbitol, VP, Dulcitol/PA, Urea, Citrato para mantener un ambiente aerobio.
Vuelva a enroscar los dos capuchones e incube EnteroPluri-Test a 36 ± 1°C durante 18-24 horas colocando en su superficie plana o verticalmente en una porta-probetas con el sector dirigido hacia arriba.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Al final de la incubación:
Observe el viraje de color de los terrenos de los distintos sectores e interprete los resultados con la ayuda de la tabla nº. 2 y eventualmente de un EnteroPluri-Test no sembrado y llevado a temperatura ambiente.
NOTA: En el caso de que el sector Glucosa/Gas no evidencie ningún cambio de color mientras que en otros sectores se evidencie una variación cromática, el microorganismo que se está examinando no pertenece a la familia de las Enterobacteriaceae. El Manual de los códigos también comprende muchos códigos de microorganismos que no fermentan la glucosa en anaerobiosis, sin embargo, en algunos casos pueden ser necesarias algunas reacciones químicas suplementarias para una identificación correcta de estos no fermentados.
Transcriba los resultados obtenidos en el módulo de recogida datos a tal efecto, a excepción del test de indol (sector H2S/Indol) y del test de Voges-Proskauer (sector VP). Sucesivamente, realice los test de indol y de Voges-Proskauer.
Test de indol
Coloque EnteroPluri-Test con la superficie plana dirigida hacia arriba e inyecte con una jeringuilla, pinchando la película de plástico, 3 o 4 gotas de Kovac?s Reagent en el sector H2S/Indol. La reacción positiva la da la aparición antes de 10-15 segundos de una coloración rosa-rojo del reactivo.
Test de Voges-Proskauer
Esta prueba es necesaria si se elige la base de datos con VP, es posible que se ejecute como una prueba de confirmación, cuando se utiliza la base de datos sin VP. Coloque EnteroPluri-Test con la superficie plana dirigida hacia arriba e inyecte con una jeringuilla, pinchando la película de plástico, 3 gotas de solución de alfa-naftol (reactivo 1) y 2 gotas de hidróxido de potasio (Reactivo 2). La reacción positiva la da la aparición antes de 20 segundos de una coloración roja.
Componga el código numérico de 5 cifras siguiendo las instrucciones recogidas en el apartado FORMACIÓN DEL CÓDIGO NUMÉRICO.
A continuación, remóntense a la identificación bacteriana utilizando el Manual de los códigos.
Tabla nº.2:
|
Sectores |
REACCIONES BIOQUÍMICAS
|
Color sector
|
|
Reacción positiva
|
Reacción negativa
|
|
Glucosas / Gas
|
Fermentación de la glucosa
|
amarillo
|
rojo
|
|
Producción de gases
|
cera suelta
|
cera adherida
|
|
Lisina
|
Descarboxilación de la lisina
|
violeta
|
amarillo
|
|
Ornitina
|
Descarboxilación de la ornitina
|
violeta
|
amarillo
|
|
H2S / Indol
|
Producción de hidrógeno sulfurado
|
negro-marrón
|
beige
|
|
Producción de indol
|
rosa-rojo
|
incoloro
|
|
Adonitol
|
Fermentación adonitol
|
amarillo
|
rojo
|
|
Lactosa
|
Fermentación lactosa
|
amarillo
|
rojo
|
|
Arabinosa
|
Fermentación arabinosa
|
amarillo
|
rojo
|
|
Sorbitol
|
Fermentación sorbitol
|
amarillo
|
rojo
|
|
VP
|
Producción de acetoína
|
rojo
|
incoloro
|
|
Dulcitol / PA
|
Fermentación del dulcitol
|
amarillo
|
verde
|
|
Deaminación de la fenilalanina
|
marrón oscuro
|
verde
|
|
Urea
|
Hidrólisis de la urea
|
púrpura
|
beige
|
|
Citrato
|
Utilización del citrato
|
azul
|
verde
|
Los 15 test bioquímicos se dividen en 5 grupos que contienen 3 test y cada test se indica con un valor de positividad de 4,2,1.
Sumando en cada grupo los números de las reacciones positivas, se obtiene un código de 5 cifras que, utilizando el Manual de los códigos, permite identificar el microorganismo en examen como aparece en el ejemplo.
Valoraciones
No hay valoraciones aún.