Detección de cocaína, 25 placas

Descripción

USO PREVISTO

La prueba rápida de cocaína en casete es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa del metabolito de la cocaína, benzoilecgonina, en orina humana para una concentración de 300 ng/ml. Este test detecta también otros compuestos relacionados con la cocaína, para lo cual puede referirse a la relación que aparece en el apartado «Especificidad». Esta técnica únicamente proporciona un resultado analítico preliminar cualitativo. Para obtener la confirmación de un resultado debe emplearse un método químico alternativo más específico. El método preferido para confirmación es el GC/MS (cromatografía gaseosa/ espectrometría). La consideración clínica y el buen juicio profesional deben aplicarse a cualquier resultado de test de drogas de abuso, en particular cuando se utilizan resultados preliminares positivos.

INTRODUCCIÓN Y SIGNIFICADO CLÍNICO

La cocaína es un potente estimulante del sistema nervioso central (CNS) y un anestésico local. Inicialmente origina una energía extrema y agitación, pasando gradualmente a temblores y espasmos. En cantidades grandes, la cocaína causa fiebre, insensibilidad, dificulta la respiración y produce inconsciencia. La cocaína es a menudo autoadministrada por inhalación nasal, inyección intravenosa y fumada. Esta se elimina a través de la orina en un breve periodo de tiempo, en primer lugar como benzoilecgonina, que es el metabolito principal de la cocaína. Éste tiene una vida media biológica (5-8 horas) mayor que la de la cocaína (0,5 -1,5 horas) y generalmente puede ser detectado hasta 24-48 horas después de su consumo.

La prueba rápida de cocaína en casete (orina) puede realizarse sin necesidad de utilizar ningún aparato. Utiliza anticuerpos monoclonales para detectar de manera selectiva niveles elevados de metabolitos de cocaína en orina y origina resultados positivos cuando éstos superan el nivel de 300 ng/ml. Este es el nivel de detección que se establece para muestras positivas a través del Substance Abuse and Mental HealthServices Administration (SAMHSA, USA).

PRINCIPIO DEL TEST

La prueba rápida de cocaína en casete (orina) es un inmunoensayo cromatográfico rápido basado en el principio de enlaces competitivos. La droga que puede estar presente en la muestra de orina compite frente al conjugado de la misma en los puntos de unión al anticuerpo.

Durante la prueba, la muestra de orina migra hacia arriba por acción capilar. Si la benzoilecgonina está presente en la orina con una concentración inferior a 300 ng/ml, no saturará los puntos de unión de los anticuerpos. Las partículas recubiertas de anticuerpos serán capturadas por el conjugado inmovilizado de benzoilecgonina y aparecerá una línea visible de color en la línea T.

Si el nivel de benzoilecgonina está por encima de 300 ng/ml no se formará esta línea de color en T porque saturará todos los puntos de unión de los anticuerpos. Una muestra de orina positiva no generará una línea coloreada en la zona de test debido a la unión de tipo competitivo de la droga, mientras que una muestra de orina negativa o con una concentración inferior a la del punto de corte generará una línea en la zona de la prueba.

Como procedimiento de control debe aparecer siempre una línea coloreada en la línea C, si la prueba ha sido realizada correctamente y con un volumen adecuado de muestra.

REACTIVOS

La prueba contiene anticuerpos monoclonales de ratón anti-benzoilecgonina unidos a partículas y conjugados de proteína-benzoilecgonina. Se emplean anticuerpos de cabra en el sistema de la línea del control.

ALMACENAMIENTO Y CONSERVACIÓN

El test GaSS-Test Coc 300 debe almacenarse a temperatura ambiente (2-30 °C). El test se mantiene estable hasta la fecha de caducidad impresa en el envase. Mantenga el casete en su envase hasta su uso. No congele los test.

PRECAUCIONES

• Utilice un nuevo casete de prueba para cada prueba.
• Un solo uso, no reutilice el test.
• Únicamente para uso profesional de diagnóstico in vitro.
• Use solo los materiales provistos con el kit GaSS-Test.
• Utilice el test antes de 60 minutos una vez abierto el sobre.
• El casete de prueba debe estar en posición horizontal sobre una superficie lisa.
• Anote la cantidad de material de muestra utilizado. Un número incorrecto de gotas o gotas demasiado pequeñas puede derivar en resultados erróneos.
• Considere los resultados de la prueba como no válidos después del tiempo de lectura.
• No utilice la prueba después de la fecha de caducidad que figura en el sobre y tampoco si el sobre o el sellado están dañados.
• Deseche todos los materiales contaminados de forma adecuada siguiendo la normativa estándar para la manipulación de materiales potencialmente infecciosos y reactivos químicos durante la realización de la prueba. Se recomienda usar ropa protectora. Desinfecte el área de trabajo después de realizar el test. Elimine los materiales de muestra siguiendo las regulaciones locales establecidas.

OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Se debe recoger la muestra de orina en un envase limpio y seco. Se pueden usar muestras de orina recogidas en cualquier momento del día. Aquellas muestras que presenten partículas visibles deberían ser centrifugadas, filtradas o permitir que sedimenten para obtener una muestra clara antes de realizar la prueba.

ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS

Las muestras de orina pueden almacenarse entre 2 y 8 °C hasta 48 horas antes de la realización de la prueba. Para un periodo más prolongado se deben congelar a -20°C. Las muestras congeladas deben alcanzar la temperatura ambiente y mezclarse bien antes de realizar la prueba.

MATERIALES

Materiales proporcionados:
Test GaSS-Test, pipetas, manual de instrucciones.

Materiales adicionales:
Contenedores de recogida de muestras, temporizador.

PROCEDIMIENTO DEL TEST

1. Llevar a temperatura ambiente el sobre antes de abrirlo. Sacar el casete del sobre sellado y usarlo lo antes posible.
2. Colocar el casete en una superficie limpia y lisa. Tome con el gotero la muestra y colocándolo en posición vertical añada 3 gotas de orina (120 μl) en el pocillo de la muestra (S) y ponga el temporizador en marcha. Evite que queden atrapadas burbujas de aire en el pocillo de muestra.
3. Espere a que aparezcan las líneas rojas. Los resultados deberán leerse a los 5 minutos. No interprete resultados pasados 10 minutos.

INTERPRETACIÓN DEL RESULTADO

POSITIVO: Una línea roja aparece en la región de control (C). No aparecerá ninguna línea en lazona de la prueba. Este resultado positivo indica que la concentración de Benzoilecgonina excede losniveles detectables (300 ng/ml).

NEGATIVO*: Aparecen dos líneas. Una línea roja debe estar en la zona del control (C) y otra línea roja o rosa aparecerá en la zona de la prueba (T). Este resultado negativo indica que la concentraciónde benzoilecgonina está por debajo del nivel detectable (300 ng/ml).
*NOTA: La intensidad del color rojo de la línea de la región de la prueba (T) puede variar, pero cualquier coloración roja, por muy débil que sea, deberá considerarse como resultado negativo.

NO VÁLIDO: No aparece la línea de control. Un volumen de muestra insuficiente o un procedimiento incorrecto son las posibles razones de la ausencia de la línea de control. Revise el procedimiento y repita la prueba usando un nuevo test. Si el problema persiste, deje de utilizar ese lote y contacte con su distribuidor local.

CONTROL DE CALIDAD

En el test se incluye un proceso de control, que consiste en una línea coloreada que debe aparecer en la región de control (C). Esta línea se considera un procedimiento de control interno. Confirma el uso de volumen suficiente de muestra y una adecuada reacción de la membrana y técnicas procesales correctas. Con este kit no se incluyen controles positivos ni negativos. De todas maneras, se recomienda realizar controles positivos y negativos como buena práctica de laboratorio para confirmar el procedimiento de prueba y para verificar el comportamiento adecuado de la misma.

VALORES ESPERADOS

Un resultado negativo indica que la concentración de benzoilecgonina está bajo los niveles detectables de 300 ng/ml. El resultado positivo significa que la concentración de benzoilecgonina está por encima de los niveles de 300 ng/ml. El test rápido COC en casete tiene una sensibilidad de 300 ng/ml.

LIMITACIONES

1. La prueba rápida de cocaína en casete (orina) proporciona sólo un resultado analítico preliminar cualitativo. Debe emplearse un segundo método analítico para confirmar el resultado. El método analítico de confirmación más apropiado es la cromatografía de gases y espectrometría de masas (GC/MS).
2. Es posible que errores técnicos o de procedimiento, así como otras substancias que interfieren, presentes en la muestra de la orina, pueden causar resultados erróneos.
3. Adulterantes en la muestra de orina, como lejía u otros, pueden producir resultados erróneos independientemente del método analítico usado. Si se sospecha adulteración, la prueba deberá repetirse con otra muestra de orina.
4. Un resultado positivo indica la presencia de la droga o de sus metabolitos, pero no indica el nivel de intoxicación, la vía de administración o la concentración de droga en la orina.
5. Un resultado negativo no necesariamente indica la ausencia de droga en la orina. Pueden obtenerse resultados negativos cuando la droga está presente pero en niveles inferiores a los del punto de corte de la prueba.
6. La prueba no distingue entre drogas de abuso y determinados medicamentos.

CARACTERÍSTICAS DEL RENDIMIENTO

Exactitud
El test rápido de COC en casete se ha comparado con otra prueba rápida disponible comercialmente de COC. La prueba se realizó en 100 muestras clínicas previamente recogidas de sujetos disponibles para una prueba de detección de drogas. Se obtuvieron los siguientes resultados: