Descripción
PRINCIPIO
El proceso de descalcificación consiste en la eliminación de las sales de calcio presentes en los tejidos una vez fijados para obtener muestras satisfactorias en el proceso de corte de los bloques de parafina.
Se realiza en tejidos mineralizados (huesos) y en material que presenta calcificaciones que pueden dificultar la observación microscópica.
Un buen descalcificante debe eliminar completamente los depósitos de calcio sin provocar alteraciones o artefactos en los tejidos, ni interferir en los procesos de tinción posteriores.
Los agentes descalcificantes pueden clasificarse en los siguientes grupos:
- Ácidos fuertes: Disoluciones de ácido nítrico o ácido clorhídrico. El proceso de descalcificación es rápido pero se pueden alterar algunos de los antígenos tisulares necesarios para la tinción inmunohistoquímica.
- Ácidos orgánicos: Disoluciones de ácido fórmico o acético. El ácido acético puede provocar alteraciones del tejido y se usa habitualmente en mezclas con sustancias fijadoras para muestras con una calcificación mímima. El ácido fórmico, tamponado o no, actúa mas lentamente que los descalcificadores ácidos fuertes pero es aconsejable en casos en los que se requiera preservar antígenos tisulares particularmente lábiles.
- Agentes quelantes: Disoluciones de EDTA. Es un buen descalcificador para tinciones inmunohistoquímicas o enzimáticas, pero el proceso es muy lento.
USO PREVISTO
Familia de productos sanitarios para diagnóstico in vitro para la descalcificación de tejidos en histología.
Son reactivos que no poseen criterio diagnóstico por si solos ya que se utilizan como auxiliares para la posterior aplicación de técnicas específicas de diagnóstico que interpretadas por profesional cualificado son las que daran la información sobre el estado fisiológico o patológico de la muestra.
Para uso profesional de laboratorio.
COMPOSICIÓN
HCl 8 %.
EDTA 1 %.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Los reactivos almacenados a 15-30ºC son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los envases deben mantenerse siempre bien cerrados.
La estabilidad en uso debe ser determinado por cada usuario según su criterio.
MATERIAL NO SUMINISTRADO
Material de uso general de laboratorio de anatomía patológica.
Formol (ver Fijadores Tisulares QCA).
PRECAUCIONES
Los reactivos se deben manipular con precaución. Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo. La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa local vigente.
Cualquier incidente grave relacionado con el producto deberá comunicarse a QCA y a la autoridad competente del estado en el que esté establecido el usuario.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda seguir las prácticas de control de calidad marcadas por los organismos internacionales y realizar tinciones de forma periódica con preparaciones de control de calidad que contengan muestras procesadas de forma similar a las muestras a evaluar.
MUESTRA
Muestras histológicas.
La manipulación de las muestras debe realizarse de acuerdo con los protocolos establecidos en cada laboratorio para la preparación de muestras, siguiendo el estado del arte vigente.
Manipular las muestras con precaución por su capacidad potencialmente infecciosa.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
El reactivo está listo para su uso.
PROCEDIMIENTO
El proceso de descalcificación se lleva a cabo a 4ºC y en agitación para asegurarse que toda la muestra está en contacto con el descalcificador. El tiempo requerido puede variar de días a semanas dependiendo del estado, del tamaño y de la densidad de la muestra tratada.
- Fijar la muestra y lavar con agua destilada para poder empezar con la descalcificación.
- Colocar la muestra en el descalcificador en agitación a 4 °C. El volumen de descalcificador tiene que ser 20 veces el volumen de la muestra.
- Cambiar el descalcificador dos o tres veces por semana. La descalcificación está completa cuando la muestra es blanda y maleable.
- Una vez finalizado el proceso, la muestra se lava con agua destilada, con disolución acuosa de carbonato de litio o de bicarbonato sódico para la eliminación del descalcificante utilizado y se procede con la siguiente etapa.
Cada usuario debe validar este procedimiento en su laboratorio para ajustarlo a su metódica estándar, aplicando las diversas variantes de este procedimiento, tanto manual como automático, que le permita optimizar los resultados.
RESULTADOS
La muestra descalcificada presenta una consistencia cartilaginosa y muestra una débil resistencia.
NOTAS
La presencia de EDTA permite reducir la concentración de ácido inorgánico sin que aumente el tiempo total del proceso. Con ello se consigue una menor alteración del tejido lo que se refleja en unos resultados óptimos en la tinción.
El proceso de fijación debe haberse completado antes de iniciar la descalcificación para evitar en lo posible los efectos adversos del tratamiento con el descalcificante.
Mantener el descalcificador en agitación con la pieza preferentemente en el centro del recipiente. De este modo se evitan concentraciones elevadas de calcio alrededor de la muestra.
No se aconseja utilizar temperaturas de tratamiento superiores a los 25ºC, ya que aunque el proceso se acelera también se incrementa el riesgo de alteraciones de la muestra.
El punto final de la descalcificación debe controlarse para evitar una sobeexposición del tejido al agente ácido. Para ello se pueden utilizar los diversos métodos físicos o químicos descritos.
CONTIENE
1 x 2.500 ml
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