Danagene plant DNA, kit para 50 extracciones

Descripción

DESCRIPCIÓN DEL PRODUCTO

Este kit provee un método para una eficiente y rápida extracción de ADN genómico a partir de tejidos y células de plantas y hongos.

Es conocido que las plantas contienen cantidades de diferentes sustancias (polisacáridos, polifenoles, etc.) y que plantas del mismo género o géneros relacionados pueden presentar enormes variabilidades en sus composiciones bioquímicas, de esta forma, se hace difícil de disponer de un único método de extracción de ADN para todas las plantas.

Para solventar este problema y poder abarcar el mayor número de plantas posibles DANAGEN-BIOTED utiliza una solución de PVP que es capaz de unir los polisacáridos y polifenoles que se liberan mediante la lisis celular y que poseen la capacidad de formar complejos con los ácidos nucleicos y degradarlos o hacer que precipiten con ellos.

El procedimiento incluye una homogenización de la muestra en un Tampón de extracción y la Solución de PVP. La lisis se completa con la incubación en un Tampón de Lisis y RNasa a 37 ºC durante 30 minutos.

Las proteínas celulares y restos celulares son eliminados mediante una Tampón de precipitación de proteínas, lo que permite dejar el ADN genómico en solución. Finalmente el ADN genómico es aislado por una precipitación con isopropanol.

COMPONENTES DEL KIT Y CONDICIONES DE ALMACENAJE

Componente	Presentación	Conservación
Tampón de Extracción	25 ml	Tª ambiente
Solución de PVP	10 ml	4ºC
Solución de Lisis	3 ml	Tª ambiente
RNasa	150 μl	4ºC o –20ºC
Tampón de precipitación proteínas	18 ml	Tª ambiente
Tampón de Hidratación	5 ml	Tª ambiente

Todos los componentes son estables durante 12 meses desde la fecha de compra siendo almacenados y utilizados como se indica.

PROTOCOLO DE EXTRACCIÓN DE ADN GENÓMICO A PARTIR DE 10-20 mg DE TEJIDO DE PLANTA O 10-20 mg DE TEJIDO DE HONGO

En aquellas especies con elevadas cantidades de polisacáridos se puede realizar una purificación posterior que suele producir una reducción en el ADN obtenido pero de mayor calidad. Para ello valorar si las subsiguientes manipulaciones del ADN son inhibidas.

NOTA: Para procesar muestras de mayor tamaño, ver la tabla adjunta con los reactivos escalados según el tamaño de la muestra y proceder como el protocolo descrito aplicando las cantidades correspondientes.

Cantidad de tejido en mg	10-20	25-35	40-50	100	150	250
Tamaño tubo	1,5 ml	2,0 ml	15 ml	15 ml	15 ml	30 ml
Tampón de extracción	0,40 ml	0,50 ml	0,80 ml	1,60 ml	2,40 ml	4,00 ml
Solución de PVP	0,20 ml	0,25 ml	0,40 ml	0,80 ml	1,20 ml	2,00 ml
Solución de Lisis	60 μl	75 μl	120 μl	240 μl	360 μl	600 μl
RNasa	3 μl	4,5 μl	6 μl	12 μl	18 μl	30 μl
T. Precipitación de proteínas	0,36 ml	0,45 ml	0,72 ml	1,45 ml	2,15 ml	3,60 ml
Isopropanol	0,60 ml	0,75 ml	1,35 ml	2,70 ml	4,00 ml	7,00 ml
Tampón hidratación (μl)	100 μl	150-200 μl	200-300 μl	300-400 μl	400-500 μl	500-600 μl

Danagene plant DNA, kit para 50 extracciones

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