Descripción
DESCRIPCIÓN
Práctica, de nivel básico, que constituye la introducción a la Biología Molecular. Este kit permite realizar extracciones básicas de ADN a partir de tejidos animales (hígado de pollo) y vegetales.
El kit contiene todo lo necesario para que cada alumno pueda llevar a cabo la práctica individualmente, en la propia clase.
- No necesita ningún aparato o material adicional.
OBJETIVO DEL EXPERIMENTO
Kit que permite realizar extracciones básicas de ADN a partir de tejidos animales (hígado de pollo).
No se necesita ningún aparato (baño incubador, centrífugas, etc.) dirigida a cualquier tipo de estudiante.
A diferencia de los métodos caseros, el ADN aparece como una hebra o hilo blanco en la solución.
Es muy IMPORTANTE que las muestras de hígado sean frescas para obtener un resultado visible del ADN.
COMPONENTES
- Solución de Lisis (tapón azul): 3 ml.
- Solución Salina (tapón rojo): 1,5 ml.
- Isopropanol (tapón blanco): 2 ml.
- 1 filtro de papel.
- 3 pipetas de 3 ml.
- 2 tubos de 10 ml.
- 1 varilla de vidrio.
- 1 embudo.
*Conservar el Isopropanol siempre a 4 ºC, sino fuera posible, como mínimo 2 horas antes de realizar el experimento.
PRÁCTICA
Pesar 250 mg de hígado. Estas cantidades no deben ser exactas (no sobrepasar 300 mg ni inferior a 150 mg).
Es muy IMPORTANTE que las muestras sean frescas para obtener un resultado visible del ADN.
Pasar la muestra al tubo de 10 ml suministrado.
Añadir 3 ml de Solución de Lisis (tapón azul) e incubar durante 15 minutos. Homogenizar las muestras con la varilla de vidrio hasta la completa disolución de los tejidos (ver foto), para ello triturar con la varilla al principio y cada 5 minutos hasta los 15 minutos.
Añadir 1,5 ml de Solución Salina (tapón rojo).
Agitar para precipitar las proteínas.
Colocar un embudo en un tubo nuevo de 10 ml y un filtro de papel en el embudo y filtrar la solución. Se suelen recoger 1,5 – 2 ml.
Añadir 2 ml de isopropanol frío (tapón blanco), agitar suavemente para que aparezca el ADN como una hebra.
Es importante que el isopropanol haya estado mínimo 2 horas a 4 ºC y la agitación debe ser suave para no disgregar las hebras del ADN.
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