Descripción
PRINCIPIO DEL TEST
La creatin quinasa sérica (CK) libera la creatina del sustrato fosfocreatina en presencia del cofactor ADP que pasa a ATP. El ATP formado, en presencia de glucosa, reacciona mediante la acción de la hexokinasa dando lugar a la formación de glucosa-6-fostato, que es degradada a fosfogluconato por acción de la glucosa-6-fosfato-deshidrogensa mientras que el cofactor NADP+ se reduce a NADPH, con el consiguiente cambio en la Abs del sistema.
En condiciones óptimas de reacción, la ΔAbs/min es proporcional a la concentración de enzima creatin quinasa presente en la muestra.
CK
fosfocreatina + ADP → creatina + ATP
HK
ATP + glucosa→ glucosa-6-fosfato + ADP
G-6-PDH
glucosa-6-fosfato + NADP+ → 6-fosfogluconato + NADPH + H+
UTILIDAD DIAGNÓSTICA
La mayoría de los casos de aumento de los valores de la CK están relacionados con enfermedades del músculo esquelético o del corazón. Se encuentran valores superiores a los habituales después de traumatismos, cirugía, trastornos miopáticos, infartos de miocardio, hipotermia prolongada o hipotiroidismo. También en casos de síndrome de Reye o de enfermedad de Duchenne. Los valores inferiores a los de referencia pueden reflejar una vida sedentaria o la presencia de masa muscular escasa.
Una única prueba de laboratorio no permite establecer un diagnóstico. Los resultados se han de evaluar en el contexto de todos los datos clínicos y de laboratorio obtenidos.
REACTIVOS
1 x 100 mL Disolución tampón Ref. 994910
1 x 25 mL Sustrato Ref. 996918
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
Los reactivos están listos para su uso.
En caso de que se quiera trabajar como Monorreactivo: mezclar los volúmenes deseados, pero manteniendo la proporción 4 partes de A (Disol. tampón) + 1 parte de B (Sustrato).
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
Las concentraciones en la disolución reactiva son:
Tampón Imidazol/Ac. acético pH 6,7 120 mM.
Glucosa 23 mM.
Fosfocreatina 36 mM.
Mg2+ 12 mM.
ADP 3 mM.
AMP 7 mM.
N-acetilcisteína 21 mM.
NADP+ 2.2 mM.
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa ≥ 3.500 U/l.
Hexoquinasa ≥ 7.500 U/l.
Estabilizantes y conservantes.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Los componentes del kit almacenados 2-8ºC, son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
Una vez mezclados los componentes A y B, la disolución monorreactiva es estable 2 semanas mantenida a 2-8ºC o a temperatura ambiente (≤ 25ºC), protegido de la luz.
Indicaciones de alteración de los reactivos:
Presencia de turbidez o de partículas.
Blanco del reactivo de trabajo ≥ 0,800.
MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO
Material común de laboratorio.
Espectrofotómetro, analizador automático o fotómetro termostatizado a 37ºC.
Cubeta de 1 cm de paso de luz.
MUESTRA
Suero o plasma con heparina o EDTA. La hemólisis ligera no interfiere en la prueba.
La muestra es estable 1 semana a 2-8ºC.
PRECAUCIONES
Los reactivos contienen azida sódica al 0,09%, manipular con precaución.
Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. El calibrador debe considerarse como una muestra humana y por lo tanto potencialmente infeccioso. Utilizar protección adecuada.
Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo.
La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa local vigente.
CONTROL DE CALIDAD
Es recomendable la inclusión de sueros control, Seriscann Normal (Ref. 994148) y Seriscann Anormal (Ref. 994685) en cada proceso de medida para verificar los resultados.
Se aconseja que cada laboratorio establezca su propio programa de control de calidad y los procedimientos de corrección de las desviaciones detectadas.
AUTOANALIZADORES
Adaptaciones a distintos analizadores automáticos están disponibles bajo demanda.
PROCEDIMIENTO
Llevar el reactivo de trabajo y el instrumento a la temperatura de trabajo.
Técnica | Monorreactivo 37ºC (μL) |
Birreactivo 37ºC |
---|---|---|
Reactivo de trabajo |
1.000
|
—
|
Disol. Tampón (A)
|
—
|
1.000
|
Muestra
|
40
|
50
Mezclar e incubar 1 min |
Sustrato tamponado (B)
|
—
|
250
|
Valoraciones
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