Descripción
PRINCIPIO
La parafina es una sustancia de aspecto ceroso que está formada por mezclas de hidrocarburos saturados. A temperatura ambiente es sólida y su punto de fusión puede variar entre 40 °C y 70 °C según la composición de la mezcla de hidrocarburos. Las parafinas más usadas tienen un punto de fusión en torno a los 60 °C.
La parafina es el medio más común utilizado para el procesamiento de tejidos en muestras histológicas y citológicas durante las etapas de infiltración e inclusión. En esta etapa la parafina utilizada a la correcta temperatura es capaz de penetrar dentro del tejido y crear un bloque sólido que posteriormente será cortado en secciones muy finas con la ayuda de un microtomo para su posterior tinción y observación en el microscopio.
Debido a que la parafina no es soluble en agua las diferentes muestras de origen humano deben pasar por una serie de etapas secuenciales: fijación, deshidratación y aclaramiento. Las muestras se fijan con alguno de los fijadores tisulares disponibles. A continuación, se deshidratan con cuidado con agentes deshidratantes de diferente graduación, pasando del agente deshidratante con más baja graduación al absoluto. Después de la deshidratación, el tejido se trata con un producto intermedio soluble en alcohol y en parafina, el xileno o el sustituto de xileno y así poder terminar el proceso con la última etapa de inclusión en parafina.
USO PREVISTO
Familia de productos sanitarios para diagnóstico in vitro para uso auxiliar como medio de infiltración en muestras de tejido para histología.
Son reactivos que no poseen criterio diagnóstico por si solos ya que se utilizan como auxiliares para la posterior aplicación de técnicas específicas de diagnóstico que interpretadas por profesional cualificado son las que daran la información sobre el estado fisiológico o patológico de la muestra.
Para uso profesional de laboratorio.
ESPECIFICACIONES
Punto de fusión/congelación: 54 – 57ºC.
Viscosidad a 100ºC: 5,5 – 7,5 cSt.
Saybolt color: ≥ 25.
Needle penetration (25ºC): 10-20.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Los reactivos almacenados a 15-30ºC son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los envases deben mantenerse siempre bien cerrados.
La estabilidad en uso debe ser determinado por cada usuario según su criterio.
MATERIAL NO SUMINISTRADO
Material de uso general de laboratorio de anatomía patológica.
Colorantes de histocitología.
Agentes deshidratantes de diferentes concentraciones (ver Agentes deshidratantes QCA).
Formol (ver Fijadores Tisulares QCA).
Medio de montaje.
Microtomo.
Microscopio.
PRECAUCIONES
Los reactivos se deben manipular con precaución. Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo. La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa local vigente.
Cualquier incidente grave relacionado con el producto deberá comunicarse a QCA y a la autoridad competente del estado en el que esté establecido el usuario.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda seguir las prácticas de control de calidad marcadas por los organismos internacionales y realizar tinciones de forma periódica con preparaciones de control de calidad que contengan muestras procesadas de forma similar a las muestras a evaluar.
MUESTRA
Muestras histológicas.
La manipulación de las muestras debe realizarse de acuerdo con los protocolos establecidos en cada laboratorio para la preparación de muestras, siguiendo el estado del arte vigente.
Manipular las muestras con precaución por su capacidad potencialmente infecciosa.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
El reactivo está listo para su uso.
PROCEDIMIENTO
HISTOPROCESAMIENTO
Ejemplo:
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Fijación |
Formol/Fijador tisular
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Deshidratación
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Etanol 50%
Etanol 70%
Etanol 96%
Etanol absoluto
Etanol absoluto
Etanol absoluto
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1 hora
2 horas
2 horas
2 horas
1 hora
1 hora
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Aclarado
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Xileno/Sustituto xileno
Xileno/Sustituto xileno
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1 hora
1 hora
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Inclusión
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Parafina
Parafina
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1 hora
2 horas
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Los tiempos de cada etapa dependen del tipo y tamaño de las muestras a procesar. La muestra impregnada de parafina se vierte en un molde y se deja solidificar. Estos bloques de parafina se deben almacenar refrigerados.
Las muestras incluidas en los bloques de parafina se preparan para la tinción realizando previamente cortes muy delgados con el microtomo. Para facilitar estos cortes, se recomienda calentar la cuchilla antes de su uso
Estos cortes se desparafinan, rehidratan y posteriormente se tiñen (ver colorantes QCA para Histopatología) siguiendo el procedimiento histológico adecuado en cada caso. Para conseguir un resultado óptimo de la tinción, deben respetarse las instrucciones de uso de cada técnica descritas en el prospecto, así como las indicaciones de uso y mantenimiento de los equipos.
Después de la tinción los cortes se deshidratan de nuevo con alcoholes de diferente graduación y se aclaran con xileno para acto seguido ser montados y almacenados con medios de montaje adecuados.
Cada usuario debe validar este procedimiento en su laboratorio para ajustarlo a su metódica estándar, aplicando las diversas variantes de este procedimiento, tanto manual como automático, que le permita optimizar los resultados. Se debe tener en cuenta que la intensidad de la coloración es proporcional al tiempo de tinción.
El resultado de la tinción variará en función de la técnica utilizada. En los prospectos de cada tinción se encuentran descritos los resultados esperados. Los resultados deben ser elaborados por personal especializado debidamente cualificado.
Se recomienda controlar los baños de parafina, en lo que se refiere a la temperatura adecuada de funcionamiento (aproximadamente 4ºC sobre el punto de solidificación) como en el cambio regular de la parafina para evitar interferencias con las muestras. Mantener el microtomo en condiciones adecuadas para un correcto funcionamiento. Mantener en buenas condiciones las cubetas de los alcoholes y los reactivos de tinción.
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