Campylobacter Agar, 20 Placas

Descripción

FÓRMULA TEÓRICA

• Peptona caseína 3 g/L.
• Peptona gelatina 10 g/L.
• Extracto carne 10 g/L.
• Sodio cloruro 5 g/L.
• Carbon activado 5 g/L.
• Sodio Metabisul. 0,25 g/L.
• Sulfato Hierro II 0,25 g/L.
• Bilis bacteriológica 0,5 g/L.
• Agar bacteriológico 17 g/L.
• Cefoperazona 0,032 g/L.
• pH: 7,2 ±0,2.

DESCRIPCIÓN Y USOS

Un gran paso para reconocer el papel de Campylobacter spp como causa de gastroenteritis humanas fue el desarrollo de medios de aislamiento con antibióticos para suprimir la flora fecal acompañante.Según la revisión de Gun Monro, y la ratificación de los resultados por Grifliths and Ribeiro, evaluando varios medios selectivos para Campylobacter termofílicos, se llegó a las siguientes conclusiones:

• La mayor recuperación y el mayor aislamiento de Campylobacter se logró en el medio CCDA modificado, sólo superado por un Agar Sangre de Control.
• La supresión de flora fecal acompañante en el medio CCDA modificado fue la mayor quantitativamente tanto a las 24 y a las 48 horas de incubación. El medio Campylobacter sin sangre se basa en formulaciones de Bolton y se recomienda para crecimiento/aislamiento de especies de Campylobacter a partir de muestras de heces humanas.

Este medio, referenciado como CCDA Modificado (Charcoal Cefoperazone Deoxycolate Agar) fue desarrollado substituyendo la sangre por Carbón Activo, sulfato ferroso y piruvato sódico, que potencian el crecimiento de Campylobacter y aumentan su aerotolerancia. El hidrolizado de caseína fue también hallado como potenciador para C. laridis. Como agentes selectivos contiene deoxicolato sódico y cefoperazona en lugar de la cefazolina de las formulaciones originales. La máxima recuperación se obtiene con incubación microaerofílica a 42±2 ºC durante 72 horas. El crecimiento y la selectividad se ven favorecidas por la temperatura de 42±2 ºC. Las placas que después de una primera lectura deban reincubarse, deben someterse tan pronto como sea posible a una atmósfera microaerofílica para favorecer la viabilidad de cepas sensibles al oxígeno.

UTILIZACIÓN

Antes de la siembra es recomendable que las placas alcancen la temperatura ambiente y que la superficie aparezca húmeda sin exceso de agua.

Sembrar con escobillón estéril muestra reciente de heces o una emulsión de las mismas en agua peptonada para mejorar la obtención de colonias aisladas.

Incubar las placas en atmósfera microaerofílica (5-6 % Oxígeno, 10% Dióxido de Carbono y 85% Nitrógeno) durante 72 horas a 42±2 ºC. Examinar las placas a las 24 h y a las 48 horas para confirmar las colonias susceptibles de ser Campylobacter.

La morfología de las colonias puede usarse como orientación identificativa. La mayoría de colonias aparecen, en contraste con el medio, como colonias grises, planas, más o menos brillantes, que tienden a presentar fenómenos de «swarming» con incubaciones prolongadas.

El tamaño de las colonias es también muy variable. La identificación presuntiva en este medio debe completarse con pruebas de laboratorio tales como Catalasa, Hipurato, Nitratos, entre otras.

CONSERVACIÓN

Las placas han de conservarse a temperaturas entre 4 y 15 ºC, preservándolas de la luz. La fecha de caducidad y el número de lote vienen indicados en la base de cada placa individualmente.

CONTROL DE CALIDAD

Respuesta típica incubando a 42±2 ºC en microaerofilia, durante 72 horas: