Descripción
PRINCIPIO
Los reticulocitos son glóbulos rojos que no han alcanzado su total madurez. Son células anucleadas predecesoras de los eritrocitos con la diferencia de que poseen gránulos de ribosomas, ARN y algunas mitocondrias. Estas estructuras se presentan en forma de red de filamentos y gránulos que se tiñen en el frotis de sangre, distinguiéndose así los reticulocitos de los glóbulos rojos maduros. El Azul de Cresilo Brillante es de naturaleza basófila y presenta afinidad por las mitocondrias y ribosomas, dando lugar a precipitados de color azulado en forma de gránulos o filamentos en el interior de los eritrocitos. A mayor grado de inmadurez de la célula el material precipitado es mayor.
El reticulocito tiene una vida media de dos días en médula ósea, de allí sale a la circulación donde requiere un día para convertirse en globulo rojo maduro. Durante este período sintetiza el 20% de la hemoglobina contenida en la célula roja.
Su recuento permite evaluar la producción eficaz de eritrocitos por la médula ósea y conocer su capacidad de regeneración. Los recuentos reticulocitarios superiores a los valores normales, indican aumento en la eritropoyesis, situación que se presenta como respuesta a hemorragias, anemias hemolíticas y durante el tratamiento de anemias nutricionales (anemia ferropénica y anemia megaloblástica). Los recuentos bajos de reticulocitos, sugieren una eritropoyesis defectuosa como en los casos de anemia aplásica, crisis aplásica de anemias hemolíticas y en la infiltración de la médula ósea por células tumorales.
USO PREVISTO
Familia de productos sanitarios para diagnóstico in vitro destinados a la tinción de reticulocitos en extensiones de sangre para hematología.
Son colorantes cualitativos que dan información sobre el estado fisiológico o patológico de la muestra de tejido cuando la tinción obtenida es interpretada por profesional cualificado. Para obtener un diagnóstico, los resultados se han de evaluar en el contexto de los antecedentes médicos, el estado físico y el resto de datos clínicos y de laboratorio obtenidos.
Para uso profesional de laboratorio.
COMPOSICIÓN
Colorante Azul de Cresilo, CI nº 51010 3,0 g/L.
NaCl 150 mM.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Los reactivos almacenados a 15-30ºC y protegidos de la luz, son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los envases deben mantenerse siempre bien cerrados.
El paso del tiempo y temperaturas inferiores a 15ºC, pueden provocar la aparición de un ligero precipitado en algún reactivo, que no afecta a la funcionalidad del producto.
Se aconseja atemperar el reactivo a 15-30ºC, agitar y filtrar el colorante antes de su uso.
La estabilidad en uso debe ser determinada por cada usuario según su criterio
MATERIAL NO SUMINISTRADO
Material de uso general de laboratorio.
Láminas para la extensión de la sangre.
Microscopio.
PRECAUCIONES
Los reactivos se deben manipular con precaución. Las indicaciones de seguridad se encuentran en la etiqueta de los productos. Se aconseja consultar la ficha de datos de seguridad antes de la manipulación del reactivo. La eliminación de residuos debe hacerse según la normativa local vigente.
Cualquier incidente grave relacionado con el producto deberá comunicarse a QCA y a la autoridad competente del estado en el que esté establecido el usuario.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda seguir las prácticas de control de calidad marcadas por los organismos internacionales y realizar tinciones de forma periódica con preparaciones de control de calidad que contengan muestras procesadas de forma similar a las muestras a evaluar.
MUESTRA
Extensiones de sangre y médula osea secadas al aire.
La manipulación de las muestras debe realizarse de acuerdo con los protocolos establecidos en cada laboratorio para la preparación de muestras, siguiendo el estado del arte vigente.
Se recomienda que sean finas y homogéneas para obtener una mejor fijación del colorante sin sobrecoloraciones.
Para obtener buenos resultados se aconseja realizar la tinción durante las dos horas siguientes a la preparación. Las extensiones viejas, pueden teñirse de forma irregular. La muestra idónea es sangre venosa con EDTA como anticoagulante pero se puede usar sangre capilar.
Manipular las muestras con precaución por su capacidad potencialmente infecciosa.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO
El colorante está listo para su uso.
PROCEDIMIENTO
- Mezclar 20 μL de sangre total con 20 μL de colorante en un tubo de hemólisis.
- Mantener la mezcla 30 minutos a temperatura ambiente y mezclar de nuevo.
- Preparar la extensión de sangre de la manera habitual.
- Dejar secar al aire.
Observar al microscopio con objetivo de inmersión.
Cada usuario debe validar este procedimiento en su laboratorio para ajustarlo a su metódica estándar, aplicando las diversas variantes de este procedimiento, tanto manual como automático, que le permita optimizar los resultados. Se debe tener en cuenta que la intensidad de la coloración es proporcional al tiempo de tinción.
RESULTADOS
Reticulocitos: Los filamentos reticulares aparecen teñidos de color azul intenso en contraste con el resto de la célula de color azul – gris pálido.
Leucocitos: Núcleos en color azul.
Eritrocitos: Sin teñir
CÁLCULOS
El número de reticulocitos se compara con el número total de glóbulos rojos y se informa como un porcentaje de reticulocitos:
Reticulocitos(%)=[número de reticulocitos / Número total de glóbulos rojos] x 100.
Los valores normales en adultos se encuentran entre el 0,5 y 1,5%.
NOTAS
El resultado de la tinción es orientativo y debe confirmarse con pruebas adicionales adecuadas. Los resultados de coloración indicados son orientativos ya que la intensidad y la tonalidad del color pueden ser influenciados por diferentes factores, por ejemplo el tiempo de tinción.
El tiempo de tinción no está estandarizado y algunos autores preconizan un tiempo de interacción sangre-colorante más corto, incubando la mezcla a 37ºC durante 15 min.
Si se elige esta opción se debe mantener el tubo de la mezcla bien cerrado para evitar evaporaciones.
CONTIENE
1 x 100 ml
PRO4-9_ACREB_5
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