Descripción
PRINCIPIO DEL MÉTODO
Plasma citratado, un activador de contacto y fosfolípidos procoagulantes (tromboplastina parcial de origen animal) se mezclan e incuban a 37ºC. El activador de contacto activa la vía intrínseca, incluyendo el kininógeno de alto peso molecular, la precalicreína, el Factor XI, y el Factor XII. Los fosfolípidos proporcionan una superficie para la interacción de los factores de la coagulación presentes en la muestra. Después de una incubación, una concentración adecuada de calcio es añadida, y se mide el tiempo transcurrido hasta la formación del coágulo. El calcio es imprescindible para la formación de un complejo para la activación de la cascada de coagulación (vía intrínseca) a partir del Factor XIa.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La prueba de tiempo de tromboplastina parcial activada (o APTT de las siglas en inglés) es uno de los más utilizados en los laboratorios de hemostasia. Este test se utiliza con diversos propósitos: screening preoperativo, screening de deficiencias de factores de coagulación, screening de diversos inhibidores de factores de la coagulación (p.ej. anticoagulantes lúpicos), y para el control de la terapia anticoagulante con heparina. El APTT determina la integridad de las vías intrínseca y común de la cascada de la coagulación. Representa el tiempo, en segundos, después de añadir a un plasma de paciente fosfolípidos, un activador de la vía intrínseca (sílica, celita, kaolina, ácido elágico, etc.) y calcio (para revertir el efecto del anticoagulante en el tubo de recogida). El reactivo APTT se denomina ?tromboplastina parcial? debido a que los fosfolípidos presentes no contienen factor tisular, como es el caso en el reactivo de tromboplastina para determinar el tiempo de protrombina (PT). Como consecuencia, deficiencias o presencia de inhibidores de factores de coagulación de las vías intrínsecas y común resultan en una prolongación del APTT.
REACTIVOS
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R1 Activador |
Ácido elágico. Tampón y conservantes.
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R2 Iniciador
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Cloruro cálcico (CaCl2) 0,02M
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Opcional
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PREPARACIÓN
Los reactivos están listos para su uso.
R1: Una vez abierto es estable 1 mes a 2-8ºC.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.
Después de un almacenamiento prolongado puede aparecer un sedimento amarillo.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. No congelar el reactivo.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
- Presencia de partículas y turbidez.
- Resultados en el Control de calidad fuera de los rangos establecidos.
- Variaciones de color.
MATERIAL ADICIONAL
- Coagulómetro o cronómetro y baño a 37ºC ± 0,5ºC.
- Equipamiento habitual de laboratorio.
MUESTRAS
Tomar precauciones considerando cada muestra como potencialmente infecciosa.
Identificar apropiadamente cada tubo de muestra respetando la privacidad del paciente; manteniendo una trazabilidad inequívoca con la hoja de pedido de análisis incluyendo información detallada del paciente.
Extraer sangre por venopunción hacia un tubo plástico o vidrio siliconizado estéril con vacío y anticoagulante, por ejemplo, citrato; eliminar muestras: coaguladas, tubos con demasiado/insuficiente volumen de muestra, observando estrictamente la proporción de sangre (9 partes) y solución de citrato sódico (0,11 mol/L; 1 parte).
PROCEDIMIENTO
El reactivo puede emplearse en técnica manual, mecánica, foto-óptica o con cualquier instrumento apto para detectar la formación del coágulo (Nota 2). En caso de emplearse analizadores automáticos, seguir las instrucciones del analizador en cuestión.
TÉCNICA MANUAL
- Calentar a 37ºC los reactivos y la muestra.
- Mezclar bien los reactivos sin agitarlos.
- Pipetear en un tubo de ensayo limpio y seco:
| Plasma citratado |
100 μL |
| R1 |
100 μL
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Valoraciones
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