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Amilasa líquida 2×60 ml

63,44 €

Determinación cuantitativa de amilasa (AMS). IVD.
Conservar a 2-8ºC.

2 disponibles (puede reservarse)

Descripción

PRINCIPIO DEL MÉTODO

La α-amilasa hidroliza el 2-cloro-4-nitrofenil-α-D-maltotriósido (CNPG3) a 2-cloro-4-nitrofenol (CNP) y forma 2-cloro-4-nitrofenil-α-Dmaltoside (CNPG2), maltotriosa (G3) y glucosa (G), según la siguiente reacción:

10 CNPG3 _Amilasa→ 9 CNP + 1 CNPG2 + G3 + G

La velocidad de formación de 2-cloro-4-nitrofenol, determinado fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de α- amilasa en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La α-amilasa (AMS) es una enzima que ayuda a digerir el glucógeno y el almidón. Se produce principalmente en las glándulas salivales y el páncreas exocrino. Su determinación se realiza principalmente para diagnosticar o controlar enfermedades del páncreas como pancreatitis crónica o aguda. Puede reflejar también enfermedad de la vesícula biliar, algunos problemas gastrointestinales y otros trastornos.

El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

REACTIVOS

R
MES pH 6,0 100 mmol/L
CNPG3 2,25 mmol/L
Cloruro sódico 350 mmol/L
Acetato cálcico 6 mmol/L
Tiocianato potásico 900 mmol/L
Ácida sódica 0,95 gr/L

PREPARACIÓN

Reactivo listo para su uso.

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.

No usar reactivos fuera de la fecha indicada.

Una vez abierto el reactivo es estable 60 días, si se cierra inmediatamente después de su uso y se conserva a 2-8ºC.

Indicadores de deterioro de los reactivos:

  • Presencia de partículas y turbidez.
  • Absorbancia del Blanco a 405 nm ≥ 0,40.

MATERIAL ADICIONAL

  • Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 405 nm.
  • Baño termostatizable a 37ºC.
  • Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
  • Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS

Suero o plasma, separado lo antes posible de los hematíes. Como anticoagulante se recomienda la heparina.

Orina, ajustar el pH aproximadamente a 7,0 antes de conservar.

Estabilidad: 1 mes a 2-8ºC.

PROCEDIMIENTO

Condiciones del ensayo:

  • Longitud de onda: 405 nm.
  • Cubeta: 1 cm paso de luz.
  • Temperatura constante: 37ºC

Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.

Pipetear en una cubeta:

 
Suero o plasma
Orina
R (mL)
1,0
1,0
Muestra (µl)
20
10

Mezclar, incubar 30 segundos.

Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.

Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto (ΔA/min).

CÁLCULOS

Suero o plasma ΔA/min x 3954 = U/L AMS
Orina ΔA/min x 7908 = U/L AMS

Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).

Factor de conversión: U/L x 0,01667 = µkat/L.

CONTROL DE CALIDAD

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).

Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.

Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

VALORES DE REFERENCIA

Suero o plasma: Hasta 90 U/L de α-amilasa.
Orina: Hasta 450 U/L de α-amilasa.

Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO

Rango de medida: Desde el límite de detección 0,2439 U/L hasta el límite de linealidad 2200 U/L.

Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/2 con NaCl 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.

Precisión:

 
Intraserie (n= 20)
Interserie (n= 20)
Media
77
194
77
197
SD
1,12
2,22
1,08
2,96
CV (%)
1,45
1,15
1,39
1,50

Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,00025 ΔA/min.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Los resultados obtenidos fueron los siguientes:
Coeficiente de regresión (r)2: 0,98628.
Ecuación de la recta de regresión: y=0,746x – 1,2697.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.

INTERFERENCIAS

La hemólisis interfiere en los resultados. La actividad -amilasa puede ser inhibida por agentes quelantes como citrato y EDTA.

Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la -amilasa.

NOTAS

La α-amilasa es temperatura-dependiente, los ensayos realizados a temperaturas <37ºC o >37ºC pueden variar los resultados.

La saliva y el sudor contienen α-amilasa. Evitar el pipeteo con la boca y el contacto de la piel con el reactivo o material empleado.

Contiene tiocianato potásico. Evitar inhalación o contacto del reactivo con la piel y ojos. En tal caso, lavar la piel y los ojos con abundante agua y consultar a un médico.

SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este reactivo en distintos analizadores.

CONTIENE

R: 2 x 60 ml.

 

 

BEIS27-E 07/06/16

Fabricado por Spinreact

 

Información adicional

Peso 0,19 kg

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