Chocolate Agar, 20 placas

FÓRMULA TEÓRICA

• Peptona caseína 15 g/L.
• Peptona soja 5 g/L.
• Glucosa 2 g/L.
• Cloruro sódico 5 g/L.
• Extracto levadura 5 g/L.
• Agar bacteriológico 15 g/L.
• Suplemento de enriquecimiento 0.015 g/L (incluye ß-NAD).
• Sangre de cordero 53 ml.
• Suero caballo 5 ml.
• pH: 7,2 ±0,2.

DESCRIPCIÓN Y USOS

El medio agar chocolate VX es un medio con hemina (factor X) y nicotinamida adenina dinucleótido (NAD, factor V), ambos factores se hallan presentes en la sangre, pero en la preparación convencional de agar sangre el factor V se degrada rápidamente, en tanto que si al añadir la sangre al medio fundido se calienta a temperatura controlada, estos factores se liberan de los hematíes y permanecen estables. El desarrollo de este medio se basa inicialmente en los trabajos de Jonhnston, quien consigue un crecimiento acelerado de N. gonorrhoeae debido a la presencia de glutamina y cocarboxilasa en un medio con menor poder gelificante. De las fórmulas iniciales hasta la actualidad, se ha variado la composición y la suplementación. Los medios de base más utilizados en la actualidad son medios ricos con peptonas de caseína y extracto de carne, almidón de maíz para neutralizar componentes tóxicos del agar y enriquecimientos como vitamina B12, PABA, aminoácidos, nucleótidos, cocarboxilasa y hierro que facilitan el desarrollo cepas exigentes de N. gonorrhoeae y N meningitidis y especies del género Haemophilus.

UTILIZACIÓN

Conviene dejar que las placas alcancen la temperatura ambiente y que ofrezcan una superficie húmeda pero no mojada para poder efectuar una siembra por agotamiento correcta. Las placas se han de incubar a 37±2ºC en atmósfera aerobia enriquecida con CO₂. La lectura de las placas debe hacerse a las 18-48 h; las colonias sospechosas de pertenecer a los géneros Haemophilus y Neisseria deben procesarse lo más rápidamente posible, especialmente N. gonorrhoeae.

ALMACENAMIENTO

Las placas deben conservarse a temperaturas entre 4-15ºC. La caducidad de los medios suplementados con sangre chocolateada de cordero es de un máximo de 3 meses a partir de la fecha de fabricación. La fecha de caducidad y el número de lote vienen indicados en la base de cada placa individualmente.

CONTROL DE CALIDAD

Respuesta típica después de una incubación de 48 h a 37±2 ºC en atmósfera del 5 % de CO₂.